MSCs诱导分化为心肌细胞分子调控机制的初步实验研究

发布时间：2021-11-05 18:01

　　目的：通过体内和体外实验研究观察骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）诱导分化为心肌细胞及相关调控基因的时序动态表达，从中筛选出调控MSCs定向分化为心肌细胞的重要基因，揭示MSCs定向分化的分子调控机制。方法：无菌条件下冲洗Wistar大鼠双侧股骨和胫骨的骨髓腔获得细胞，贴壁筛选法纯化MSCs并进行体外培养扩增。采用第八代的MSCs，在体外以5-氮杂胞苷（5-azacytidine,5-aza）进行诱导，在体内将MSCs注入正常Wistar大鼠左室前壁心肌组织内进行诱导，均连续观察8w，显微镜下观察其形态变化，荧光免疫组化方法鉴定心肌特征性蛋白肌球蛋白重链（MHC）和连接蛋白Connexin43（Cx43）的表达，应用半定量RT-PCR技术检测TGF-β、Nkx-2.5、GATA-4, MEF-2C、TEF-1和RAR（等心肌细胞发育相关调控基因mRNA在体内和体外分化过程中的时序动态表达，筛选出MSCs定向分化为心肌细胞的重要调控基因。结果：1）采用贴壁筛选法可获得纯度较高的MSCs，体外培养过程中细胞形态保持一致，扩增速度快，培养至八代时细胞... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代培养24h的MSCs(相差显微镜×200)

图 1-1 原代培养 24h 的 MSCs (相差显微镜×200) 图 1-2 原代培养 3d 的 MSCs(相差显微镜×200)Fig.1-1 The primary MSCs cultured for 24 hours Fig.1-2 The primary MSCs cultured for 3 days(phase-contrast microscope×200) (phase-contrast microscope×200)

24h 的 MSCs (相差显微镜×200) 图 1-2 原代培养 3d 的ary MSCs cultured for 24 hours Fig.1-2 The primary Microscope×200) (phase-contrast micro


本文编号：3478256