Beclin-1、P62、LC3B在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达变化

发布时间：2021-11-08 14:23

　　目的:探讨自噬相关蛋白Beclin-1、P62及LC3B在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达及意义。方法:生长至对数生长期的S.pn标准株D39用无菌PBS调节浓度为1.5×10⁹CFU/ml,采用鼻滴的方法对50只SPF级雌性Balb/c鼠（6⁸周,16²0 g）进行处理,分别在感染后0、6、12、24、48h收集Balb/c小鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）及肺组织,瑞氏-吉姆萨染色进行BALF细胞计数,HE染色观察肺组织病理学改变,Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1、P62、LC3B在肺组织中的表达水平,免疫荧光观察LC3B在肺组织中的表达情况。结果:HE染色显示,小鼠鼻饲S.pn后12h及24h后肺组织内出现大量炎症细胞浸润。BALF中总细胞数量及中性粒细胞数量于感染后6h开始增高（1.280±0.506、6.272±1.312,P=0.000;0.000±0.000、3.456±1.308,P=0.000）,在12h时达到高峰（1.280... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

经鼻滴入法构建肺炎链球菌感染小鼠肺部模型

重庆医科大学硕士研究生学位论文（2）BALF 的提取：小鼠分别在感染后 0、6、12、24、48h 提取小鼠肺泡灌，每组 5 只。小鼠麻醉、取眼球血、暴露气管、支气管及肺组织等步骤同前。小鼠气管、支气管及肺组织，用消毒缝线结扎气管近端。注射器吸取 500ul 无0.01mol/L PBS 溶液，水平插入气管，缓慢注射 PBS 溶液，可见肺组织因注射后膨胀而变大，反复抽吸 3 次，见图 3。重复上述过程 1 次，共 1ml 无菌 PBS行支气管肺泡灌洗（回抽率＞80%），冰上放置备用。

注：↗）炎症细胞浸润鼠鼻腔滴注浓度为 1.5×109CFU/ml D39 20ul 后不同时间点肺组织病理切片（色 ，100×、200×、400×）. 4 Pathological changes in lung tissues of mice at different time points after dr×109CFU/ml D39 20ul Streptococcus pneumoniae (HE staining,100×、200×、


本文编号：3483871