大鼠脑损伤运动障碍模型中移植脂肪干细胞来源的施旺细胞后细胞缝隙连接在神经功能修复中的作用

发布时间：2021-11-09 09:48

　　目的证明移植脂肪干细胞及其诱导分化而来的施旺细胞有利于急性脑损伤动物模型的功能恢复。探索细胞移植后缝隙连接在脑损伤修复过程中的作用机制。方法在运动皮层损伤偏瘫大鼠模型中,将培育分化得到的脂肪干细胞及施旺细胞以及RNAi技术沉默Cx43基因的施旺细胞移植损伤灶处行原位培养,术后观察大鼠运动功能恢复情况并予评分。移植7 d后处死取鼠脑组织,RT-PCR和Western blot验证神经生长因子（NGF）的表达水平。结果在建立的运动皮层损伤的偏瘫大鼠模型,细胞移植组大鼠优于对照组运动评分。WB结果中对照组NGF表达明显低于各移植组,Cx43基因沉默的施旺细胞移植后组织NGF表达低于未沉默组,Cx43基因未沉默组与脂肪干细胞移植组无显著性差异。RT-PCR法测得对照组NGF mRNA水平明显低于各移植组,施旺细胞组水平高于脂肪干细胞组、高于Cx43基因沉默施旺细胞组。结论移植脂肪干细胞和其经诱导分化而来的施旺细胞,都有利于动物模型的脑损伤后功能恢复。在脑损伤修复期功能性缝隙连接形成过程中,缝隙连接蛋白Cx43发挥了重要作用,可能通过促进神经生长因子NGF的表达有关。 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2019,39(06)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

移植用ADSC-SC细胞Fig.1InductionofADSC-SCsandidentificationofCx43expression.1:ADSC-SCswithRNAiforCx43,underlightmicroscope(A)andafterfluorescenceimmunocytochemistry(B).2:ADSC-SCswithRNAiforNC,underlightmicroscope(C)andafterfluorescenceimmunocytochemistry(D)

移植前各组细胞Cx43表达水平Tab.2Cx43expressioninADSCsandADSC-SCstransfectedwithRNAi-NCandRNAi-Cx43LanesCX43β-ActinsampleLane1178.98244.24A1Lane2154.25267.70A2Lane3164.09259.12A3Lane4160.33266.01B1Lane5169.54243.13B2Lane6172.41228.92B3Lane722.50250.33C1Lane825.87263.23C2Lane918.76257.92C3A1/2/3ADSCs.B1/2/3ADSCs-SCs+RNAi-NC;C1/2/3ADSCs-SCs+RNAi-CX43.CX43β-actinADSC-SCsADSC-SCs+RNAi-NC+RNAi-Cx43ADSC-SCs图2移植前细胞Cx43表达WB结果：ADSC细胞经NC对照组慢病毒转染与Cx43沉默慢病毒转染后Cx43表达差异Fig.2ExpressionofCx43inADSCsandADSC-SCstransfectedwithRNAi-NCandRNAi-Cx43.ThelevelofCx43inADSCs-SCswithRNAiforCx43groupissignificantlylowerthanbothADSCs-SCsgroupandADSCs-SCswithRNAiforNCcontrolgroup.*P<0.05vscontrolgroup.ADSC-SCsADSC-SCsADSC-SCswithRNAi-NCwithRNAi-Cx430.80.70.60.50.40.30.20.10levelofCx43expression*表3移植后各时间点各组GarciaJH评分Tab.3GarciaJHscoresineachgroupatdifferenttimepointsaftertransplantationTime(pt)1d3d6dGroup1Con(Mean±SD)6.40±0.897.20±1.92△8.00±1.22△□Group2ADSCs(Mean±SD)7.20±0.559.60±1.34*△11.00±1.41*△□Group3ADSC-SCs+RNAi-NC(Mean±SD)7.00±1.4110.00±0.71*△11.00±1.00*△□Group4ADSC-SCs+RNAi-Cx43(Mean±SD)6.65±0.559.00±0.71*△10.20±1.30*△□*P<0.05vscontrolgroup,△P<0.05vs1dpt;□P<0.05vs3dpt.NGF

Westernblot法测定各组NGF表达水平NGF

【参考文献】：
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本文编号：3485098