重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺的优化

发布时间：2021-11-12 02:05

　　目的优化重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺。方法采用试验设计（Design of Experiment,DOE）方法优化重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺,试验因子为中间清洗液Na Cl浓度（130⁸70 mmol/L）和洗脱液p H（3.50⁴.20）,试验响应变量为纯化后样品收率、纯度、残余宿主蛋白含量、外源DNA含量及蛋白A含量,通过DOE构建模型,预测中间清洗液Na Cl浓度和洗脱液p H范围。同时采用DOE方法验证预测工艺参数的稳定性。结果确定中间清洗液Na Cl浓度为400⁷00 mmol/L,洗脱液p H为3.55³.75。试验因子在该参数范围内变动时,样品收率均大于80%,纯度均大于97%,外源DNA浓度均低于260 pg/mg,宿主蛋白含量均低于2 300 ng/mg,蛋白A含量均低于6.5 ng/mg。结论成功优化了重组抗CD52单克隆抗体的亲和纯化工艺,且具有较好的稳定性。 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2019,32(04)CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 样品
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 亲和层析关键工艺参数筛选
    1.4 亲和层析参数稳定性验证
    1.5 纯度检测
    1.6 外源DNA含量检测
    1.7 残余宿主蛋白含量检测
    1.8蛋白A含量检测
    1.9 收率的计算
2 结果
    2.1 亲和层析纯化参数筛选
    2.2 亲和纯化参数的稳定性
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]人源化抗人TNFα单克隆抗体纯化工艺的优化[J]. 魏建玲,张波,刘颖,夏焕章.  沈阳药科大学学报. 2017(01)
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[4]融合蛋白ProteinA残留检测方法的建立[J]. 毕华,范文红,史新昌,丁有学,刘兰,饶春明.  药物分析杂志. 2014(02)
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本文编号：3489988