胱氨酸/半胱氨酸调控活性氧代谢影响大肠杆菌耐药性

发布时间：2021-11-12 08:41

　　【背景】随着越来越多超级细菌出现和抗生素资源的渐渐枯竭,细菌耐药机制研究愈加重要。【目的】探讨大肠杆菌内源半胱氨酸推动Fenton反应,调控胞内的活性氧水平,从而影响细菌耐药性这一代谢途径。【方法】在贫硫的培养条件下,通过控制外源胱氨酸和抗生素浓度,研究了胱氨酸/半胱氨酸对大肠杆菌耐药性的影响。【结果】较低水平的半胱氨酸使大肠杆菌对抗生素的耐药性增强,RNA-Seq的结果证明了胱氨酸内流对Fur、CysB和SOS的调控作用。LC-MS对外流硫醇的分析显示,细胞会快速将过量内流的半胱氨酸泵出胞外。在抗生素一定浓度范围内,半胱氨酸外排泵AlaE表现出良好的细胞保护作用。【结论】大肠杆菌对不同作用机理抗生素硫酸庆大霉素、氨苄青霉素和诺氟沙星的耐药性均受内源半胱氨酸水平的影响。本文通过研究半胱氨酸调控活性氧代谢对大肠杆菌耐药性的影响,为探讨细菌耐药性机制提供新的理论依据。 

【文章来源】：微生物学通报. 2019,46(10)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株
        1.1.2 主要试剂和仪器
    1.2 方法
        1.2.1 抗生素处理
        1.2.2 过氧化氢处理
        1.2.3 胱氨酸处理
        1.2.4 转录组测序及基因表达水平分析
        1.2.5 外泌硫醇检测
        1.2.6 LC-MS分析
    1.3 统计学分析
2 结果与分析
    2.1 胱氨酸对大肠杆菌抗生素及氧化损伤敏感性的影响
    2.2 胱氨酸对大肠杆菌耐药性的影响
    2.3 半胱氨酸外排泵对大肠杆菌耐药性的影响
        2.3.1 RNA-Seq分析及RT-q PCR验证
        2.3.2 AlaE通过外向转运半胱氨酸实现对细胞的保护
        2.3.3 AlaE缺失对大肠杆菌耐药性的影响
3 讨论与结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌耐药机制:内源活性氧分子的角色[J]. 李欣,钟永亮,冯友军.  中华预防医学杂志. 2018 (04)
[2]ROS在细菌耐药及抗生素杀菌中的作用机制[J]. 马丽娜,米宏霏,薛云新,王岱,赵西林.  遗传. 2016(10)
[3]细菌耐药性研究进展[J]. 朱阵,曹明泽,张吉丽,周绪正,李冰,张继瑜.  中国畜牧兽医. 2015(12)



本文编号：3490557