293T细胞模型中整合素β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响

发布时间：2021-11-14 09:57

　　目的:建立含有Calpain切割相关的β3胞浆尾段突变体的293T细胞模型,研究β3胞浆尾段不同氨基酸基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用293T细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3(β3ΔNITY（β3胞浆段截去NITY基序）、β3Δ754（β3胞浆段截去羧基末端最后8个氨基酸TNITYRGT）、β3Δ759（β3胞浆段截去羧基末端最后3个氨基酸RGT）的稳转细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能。结果:成功建立了293T-αⅡbβ3ΔNITY、293T-αⅡbβ3Δ754、293T-αⅡbβ3Δ759、293T-αⅡbβ3细胞株,稳定表达野生型整合素β3全长的293T--αⅡbβ3细胞株较293T细胞具有良好的在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,可以作为血小板的替代模型,而293T-αⅡbβ3ΔNITY稳转细胞株的黏附和伸展能力稍低于293T-αⅡbβ3稳转细胞株,但293T-αⅡbβ3Δ754细胞、293T-αⅡbβ3Δ759细胞株的黏附和伸展能力均明显受损。结论:对整合素β3介导的细胞伸展功... 

【文章来源】：中国实验血液学杂志. 2019,27(01)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料和方法
    质粒和细胞株
    试剂与仪器
    含有β3不同突变体的293T稳转细胞株的建立
    流式细胞仪检测整合素β3的表达
    细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验
    小鼠血小板在纤维蛋白原上的黏附
    统计学分析
结果
    整合素β3表达载体序列确认
    含有β3不同突变体的293T稳转细胞株的建立和鉴定
    各稳定细胞株细胞在固相化纤维蛋白原上的伸展情况
    各稳转细胞株细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附情况
讨论



本文编号：3494428