干扰素γ对人羊膜间充质干细胞的增殖及炎性因子分泌的影响
发布时间：2021-11-17 16:47
目的研究干扰素γ（IFN-γ）对人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）的增殖、凋亡及相关细胞因子分泌水平的影响。方法在hAMSCs培养基中加入不同浓度IFN-γ,之后采用细胞增殖-毒性检测试剂（CCK-8）检测hAMSCs增殖情况,流式细胞术（FCM）检测48 h时hAMSCs的凋亡情况,ELISA检测上清中炎性因子可溶性白细胞抗原G（sHLA-G）、前列腺素E2（PGE-2）分泌水平和紫外分光光度法检测犬尿氨酸（KYN）代谢含量。结果随着培养时间的延长,无IFN-γ组和含不同浓度IFN-γ组中hAMSCs的增殖从第1天至第4天,均快速生长,随后生长速度减慢;FCM检测细胞凋亡结果显示,100 ng/mL IFN-γ培养组和无IFN-γ组相比,hAMSCs无明显凋亡（P=0.78）;不同浓度10100 ng/mL IFN-γ组同无IFN-γ组比较,PGE-2、sHLA-G分泌水平显著增加（P <0.05）,同时吲哚胺2,3-二氧化酶（IDO）分解色氨酸的代谢产物KYN水平显著增加（P <0.05）,IDO酶活性增强。结论 IFN-γ在不影响hAMSCs增殖...
【文章来源】：实用医学杂志. 2019,35(12)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
SSEA4免疫荧光（×200）图2.2不同浓度IFNγ对hAMSCs增殖的
实用医学杂志2019年第35卷第12期TheJournalofPracticalMedicine2019Vol.35No.122.2不同浓度IFNγ对hAMSCs增殖的影响随着IFNγ浓度的增加，hAMSCs增殖能力未受到明显影响。无IFNγ组和含不同浓度IFNγ组中hAMSCs的增殖从第1天至第4天，均快速生长，随后生长速度减慢（图2）。2.3IFNγ对hAMSCs凋亡的影响IFNγ浓度为100ng/mL培养hAMSCs组与无IFNγ培养hAMSCs组比较，hAMSCs凋亡水平没有差异（P=0.78）（图3）。2.4IFNγ对hAMSCs细胞因子分泌水平的影响10ng/mL至100ng/mL浓度培养hAMSCs时sHLAG水平均明显升高（P<0.001）（图4A）；10ng/mLIFNγ组和无IFNγ组相比PEG2分泌水平无差别（P=0.068），30ng/mLIFNγ、50ng/mLIFNγ和无IFNγ组相比PEG2分泌水平升高（P<0.05），70ng/mLIFNγ、100ng/mLIFNγ和无IFNγ组相比PEG2分泌水平升高（P<0.01）（图4B）；10ng/mL至100ng/mL浓度培养hAMSCs时上清中KYN水平均明显升高（P<0.001），提示IDO酶活性较无IFNγ组明显增强（图4C）。3讨论50年前IFNγ作为病毒抑制蛋白首次被FrederickWheelock发现，由NKs、Th1、细胞毒CD8+T细胞、巨噬细胞等分泌的重要促炎症因子，在炎症性疾病如GVHD的起始、发生、发展中起到重要作注：A，hAMSCs表面抗原FCM分析；B，SSEA4免疫荧光（×200）图1hAMSCs免疫表型及免疫荧光鉴定Fig1IdentificationofimmunophenotypeandimmunofluorescenceofhAMSCsDAPISSEA4Merge0101
节作用。hAMSCs可通过IDO酶、sHLAG、白介素-10（interleukin10，IL10）、TGFβ1、PGE2等炎性介质调节CD4+/CD8+T细胞，诱导免疫耐受作用，调节成熟树突状细胞（maturedendriticcells，mDCs）转变成耐受性树突状细胞（tolerateddendriticcells，tDCs），进一步通过sHLAG诱导产生免疫抑制性调节性T细胞注：A，0ng/mLIFNγ组hAMSCs的凋亡；B，100ng/mLIFNγ组hAMSCs的凋亡；C，100ng/mLIFNγ组与0ng/mLIFNγ组凋亡比较，P>0.05图3100ng/mLIFNγ对hAMSCs的凋亡影响Fig3ApoptosisofhAMSCsstimulatedwith100ng/mLIFNγ105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA2.30.92.01.00.61.30.50.20.70.62.11.40.70.61.10.60.30.6Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q40100IFNγ浓度（ng/mL）P>0.051.00.80.60.40.20.0凋亡百分比（%）ABC注：A，sHLAG分泌水平；B，PGE2分泌水平；C，KYN代谢水平；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001图4IFNγ对hAMSCs炎性因子分泌水平的影响Fig4Effe
【参考文献】：
期刊论文
[1]人羊膜间充质干细胞不同移植方式治疗大鼠脊髓损伤疗效比较[J]. 马晶晶,廖旭勇,赵玉洁,喻皇飞. 实用医学杂志. 2018(04)
[2]羊膜间充质干细胞的免疫调节功能研究进展[J]. 欧阳文,廖正权,夏增飞,高雅,郭燕舞,孙海涛. 中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2017(05)
[3]人羊膜间充质干细胞与骨髓间充质干细胞对外周血淋巴细胞的免疫调节作用比较[J]. 宋洁,高雅,卓伟彬,杨春燕,许影,平宝红,孙海涛. 南方医科大学学报. 2017(06)
本文编号：3501309
【文章来源】：实用医学杂志. 2019,35(12)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
SSEA4免疫荧光（×200）图2.2不同浓度IFNγ对hAMSCs增殖的
实用医学杂志2019年第35卷第12期TheJournalofPracticalMedicine2019Vol.35No.122.2不同浓度IFNγ对hAMSCs增殖的影响随着IFNγ浓度的增加，hAMSCs增殖能力未受到明显影响。无IFNγ组和含不同浓度IFNγ组中hAMSCs的增殖从第1天至第4天，均快速生长，随后生长速度减慢（图2）。2.3IFNγ对hAMSCs凋亡的影响IFNγ浓度为100ng/mL培养hAMSCs组与无IFNγ培养hAMSCs组比较，hAMSCs凋亡水平没有差异（P=0.78）（图3）。2.4IFNγ对hAMSCs细胞因子分泌水平的影响10ng/mL至100ng/mL浓度培养hAMSCs时sHLAG水平均明显升高（P<0.001）（图4A）；10ng/mLIFNγ组和无IFNγ组相比PEG2分泌水平无差别（P=0.068），30ng/mLIFNγ、50ng/mLIFNγ和无IFNγ组相比PEG2分泌水平升高（P<0.05），70ng/mLIFNγ、100ng/mLIFNγ和无IFNγ组相比PEG2分泌水平升高（P<0.01）（图4B）；10ng/mL至100ng/mL浓度培养hAMSCs时上清中KYN水平均明显升高（P<0.001），提示IDO酶活性较无IFNγ组明显增强（图4C）。3讨论50年前IFNγ作为病毒抑制蛋白首次被FrederickWheelock发现，由NKs、Th1、细胞毒CD8+T细胞、巨噬细胞等分泌的重要促炎症因子，在炎症性疾病如GVHD的起始、发生、发展中起到重要作注：A，hAMSCs表面抗原FCM分析；B，SSEA4免疫荧光（×200）图1hAMSCs免疫表型及免疫荧光鉴定Fig1IdentificationofimmunophenotypeandimmunofluorescenceofhAMSCsDAPISSEA4Merge0101
节作用。hAMSCs可通过IDO酶、sHLAG、白介素-10（interleukin10，IL10）、TGFβ1、PGE2等炎性介质调节CD4+/CD8+T细胞，诱导免疫耐受作用，调节成熟树突状细胞（maturedendriticcells，mDCs）转变成耐受性树突状细胞（tolerateddendriticcells，tDCs），进一步通过sHLAG诱导产生免疫抑制性调节性T细胞注：A，0ng/mLIFNγ组hAMSCs的凋亡；B，100ng/mLIFNγ组hAMSCs的凋亡；C，100ng/mLIFNγ组与0ng/mLIFNγ组凋亡比较，P>0.05图3100ng/mLIFNγ对hAMSCs的凋亡影响Fig3ApoptosisofhAMSCsstimulatedwith100ng/mLIFNγ105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA2.30.92.01.00.61.30.50.20.70.62.11.40.70.61.10.60.30.6Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q40100IFNγ浓度（ng/mL）P>0.051.00.80.60.40.20.0凋亡百分比（%）ABC注：A，sHLAG分泌水平；B，PGE2分泌水平；C，KYN代谢水平；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001图4IFNγ对hAMSCs炎性因子分泌水平的影响Fig4Effe
【参考文献】：
期刊论文
[1]人羊膜间充质干细胞不同移植方式治疗大鼠脊髓损伤疗效比较[J]. 马晶晶,廖旭勇,赵玉洁,喻皇飞. 实用医学杂志. 2018(04)
[2]羊膜间充质干细胞的免疫调节功能研究进展[J]. 欧阳文,廖正权,夏增飞,高雅,郭燕舞,孙海涛. 中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2017(05)
[3]人羊膜间充质干细胞与骨髓间充质干细胞对外周血淋巴细胞的免疫调节作用比较[J]. 宋洁,高雅,卓伟彬,杨春燕,许影,平宝红,孙海涛. 南方医科大学学报. 2017(06)
本文编号：3501309
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/binglixuelunwen/3501309.html
最近更新
教材专著
