人胎盘来源的造血干细胞和间充质干细胞的分离及鉴定

发布时间：2021-11-27 09:48

　　目的建立人胎盘来源的造血干细胞（placenta hematopoietic stem cells,hP-HSCs）和间充质干细胞（placentaderived mesenchymal stem cells,hP-MSCs）的分离方法,并进行鉴定和组分分析。方法选取10份新生健康婴儿胎盘组织,采用机械破碎法联合磁珠分选法分离h P-HSCs,胎盘绒毛膜组织块贴壁法分离hP-MSCs,利用形态学观察、集落培养、流式细胞术等进行鉴定。结果 hP-HSCs:分离后有核细胞数（total nucleated cell number,TNC）为（11. 82±2. 46）×10⁸个,TNC回收率≥80%;细胞活性为（99. 7±0. 3）%;细胞表面抗体CD34⁺CD45dim表达率为（8. 69±0. 36）%,CD34⁺总数为（108. 0±6. 48）×10⁶个;集落形成总数为（1. 88±1. 07）×10⁶。hP-MSCs:冻存细胞总数为（40. 78±9. 35）×10

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2019,32(01)CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 胎盘组织
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 h P-HSCs的分离
        1.3.1 机械破碎法
        1.3.2 磁珠分选
    1.4 h P-MSCs的分离制备
    1.5 h P-HSCs的集落培养
    1.6 h P-MSCs的传代培养
    1.7 细胞表面抗体的检测
        1.7.1 分选后的CD34+细胞的流式检测
        1.7.2 hP-MSCs的流式检测
    1.8 h P-MSCs成脂、成骨诱导分化
2 结果
    2.1 h P-HSCs的分离
    2.2 h P-MSCs的分离
    2.3 h P-HSCs的集落培养
    2.4 磁珠分选后CD34+细胞和h P-MSCs的流式细胞术检测结果
    2.5 h P-MSCs的成脂、成骨诱导分化
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]3种组织来源的间充质干细胞体外成骨能力的比较[J]. 赵刚,刘微微,高伟玮,马洁.  基础医学与临床. 2017(10)
[2]人脐带非酶解法培养MSCs的方法建立[J]. 李素萍,王震,王超,王永珍,周学勇,吴学忠,杨宏友,吕蓉.  中国输血杂志. 2017(08)
[3]人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养:组织块法的优化[J]. 金宇林,吴洁莹,陆琰,陈劲松,李发涛,唐婕,刘东,梁绮华,李焱,汤雪薇,谢闺娥,吴韶清.  中国组织工程研究. 2017(21)
[4]二次贴壁法高效制备人脐带间充质干细胞[J]. 芦慧颖,杜文敬,刘春香,孟庆雪,付寅生,石佳宁,张婷婷,张怡.  中国生物制品学杂志. 2017(06)
[5]不同培养方法对人脐带间充质干细胞的影响[J]. 刘奉,蒋祥林,刘明明.  中国组织工程研究. 2016(28)
[6]人脐带和胎盘来源的干细胞分离鉴定及其组份分析[J]. 周胜利,郑超,苏建强,戚媛红,司正凯.  中国实验血液学杂志. 2015(06)
[7]胎盘组织及血液中含有丰富的造血干/祖细胞[J]. 周胜利,宋剑秋,旭日.  中国实验血液学杂志. 2002(02)
[8]深低温冻存十六年后脐血造血干细胞活性的检测[J]. 时庆,侯怀水,鞠秀丽,李栋,沈柏均.  中华血液学杂志. 2008 (08)

硕士论文
[1]胎盘来源造血干细胞分离提取和体外扩增研究[D]. 李猛.中国人民解放军军事医学科学院 2017



本文编号：3522030