人脐带间充质干细胞来源外泌体可调控巨噬细胞的极化

发布时间：2022-02-22 10:11

　　背景:间充质干细胞来源外泌体具有与母细胞类似的修复组织损伤的作用,但机制尚未完全阐明。巨噬细胞在组织损伤修复过程中扮演重要角色。因此,探讨间充质干细胞来源外泌体对巨噬细胞极化的调控作用,将有助于阐明其组织修复的机制。目的:提取人脐带间充质干细胞来源外泌体,并探讨其对巨噬细胞极化的影响。方法:采用超速离心法提取人脐带间充质干细胞分泌的外泌体,分别采用透射电镜观察其形态、纳米颗粒追踪法检测粒径、蛋白印迹法检测标志蛋白表达;然后用得到的外泌体处理小鼠骨髓巨噬细胞,探讨其对巨噬细胞极化的调控作用。结果与结论:①成功提取人脐带间充质干细胞来源外泌体,其形态呈经典的囊泡样结构,直径（92.0±34.1） nm,表达外泌体标志蛋白CD63和Alix;②该外泌体能显著降低脂多糖诱导的巨噬细胞M1型活化标志肿瘤坏死因子α和一氧化氮合酶水平,而提高M2型活化标志白细胞介素10和精氨酸酶1水平;③结果可见,人脐带间充质干细胞来源外泌体具有调控巨噬细胞向M2型极化的作用,进而发挥组织修复的功能。 

【文章来源】：中国组织工程研究. 2019,23(13)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 设计
    1.2 时间及地点
    1.3 材料
    1.4 实验方法
        1.4.1 分离培养人脐带间充质干细胞采用实验室建立的酶消化法分离脐带间充质干细胞。
        1.4.2 人脐带间充质干细胞表型鉴定
        1.4.3 外泌体提取
        1.4.4 外泌体鉴定
        1.4.5 小鼠骨髓巨噬细胞诱导及处理
        1.4.6 外泌体荧光标记
        1.4.7 CCK-8法检测细胞增殖活力
        1.4.8 流式细胞仪检测细胞周期
        1.4.9 总RNA提取和荧光定量PCR检测
        1.4.1 0 ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素10水平
        1.4.1 1 Western blot检测一氧化氮合成酶和精氨酸酶1的蛋白水平
    1.5 主要观察指标
    1.6 统计学分析
2 结果Results
    2.1 人脐带间充质干细胞的形态及表型鉴定
    2.2 外泌体的提取与鉴定
    2.3 外泌体被巨噬细胞摄取
    2.4 外泌体不影响巨噬细胞增殖活力和周期
    2.5外泌体促进巨噬细胞向M2型极化
3 讨论Discussion


【参考文献】：
期刊论文
[1]干细胞源外泌体应用于再生医学的研究进展[J]. 张恩国,陈尚雅,杨叶,杜忠君,邵华.  中国组织工程研究. 2018(05)



本文编号：3639243