人巨细胞病毒pp65 DNA疫苗的研制及其免疫保护作用的实验研究

发布时间：2022-07-02 14:54

　　目的：从HCMV AD169中扩增出pp65（1006-1521nt）抗原优势表位基因，分别克隆至原核和真核表达载体，制备了pp65蛋白质疫苗和pp65 DNA疫苗；观察其诱导Balb／c小鼠产生的体液免疫应答和细胞免疫应答，并对影响DNA免疫效果的因素进行了初步探讨和优化：研究他们阻断HCMV先天性感染的免疫保护程度。为预防母体原发性感染，阻止先天性HCMV感染寻找新的有效途径。 方法：（一） 提取HCMV DNA，然后以其为模板扩增出pp65（1006-1521nt）基因片段，克隆至原核表达载体pET100-TOPO和pcDNA3.1-TOPO真核表达载体，分别在E．coli BL21和SP2／0细胞中进行外源目的基因的表达，鉴定其特异性和免疫原性。大量表达和纯化pp65目的片段蛋白质（蛋白质疫苗）；大量提取并纯化真核表达质粒pcDNA3.1-pp65 DNA（核酸疫苗）；（二） 为了观察其诱导Balb／c小鼠产生的体液免疫应答和细胞免疫应答，36只Balb／c小鼠随机分为A、B、C、D、E、F6组，每组6只。A组（pp65蛋白质疫苗组）每只小鼠初次分别经背部皮下多点注射50... 

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
1 中文摘要
2 英文摘要
3 研究背景
4 第一部分pp65抗原优势表位基因的原核和真核表达载体的构建及表达
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
    4.3 结果
    4.4 讨论
    4.5 小结
5 第二部分HCMV pp65DNA疫苗诱导小鼠产生的免疫应答及免疫效果影响因素探讨
    5.1 前言
    5.2 材料和方法
    5.3 结果
    5.4 讨论
    5.5 小结
6 第三部分pp65 DNA疫苗及DNA初始／蛋白质加强联合免疫阻断HCMV先天性感染的免疫保护作用研究
    6.1 前言
    6.2 材料和方法
    6.3 结果
    6.4 讨论
    6.5 小结
7 小结
8 参考文献
9 附录一:个人简历
10 附录二:致谢
11 附录三
    11.1 综述
    11.2 参考文献
12 中英文词对照表


【参考文献】：
期刊论文
[1]人巨细胞病毒先天性感染胎鼠致肝脏损伤的小鼠模型[J]. 汤正好,王明丽,袁中玉,李京培.  中华传染病杂志. 2001(06)
[2]人巨细胞病毒先天性感染对ICR鼠胚胎生长及脑组织发育的影响[J]. 柳燕,王明丽,周勇.  安徽医科大学学报. 2001(02)
[3]先天性人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质钙调素基因mRNA的研究[J]. 陈贵海,王明丽,袁中玉.  中华神经科杂志. 2000(04)
[4]人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立[J]. 王明丽,唐久来,胡闻,史百芬,胡勇,毕克菊,李京培.  动物学报. 2000(02)
[5]人巨细胞病毒感染新生乳鼠原代培养脑神经细胞研究[J]. 王明丽,陈贵海,唐久来,史百芬,胡勇,汪红俊,李京培,任斌.  病毒学报. 1999(02)



本文编号：3654565