CFTR对前脂肪细胞增殖和分化的影响

发布时间：2022-08-08 18:58

　　【目的】探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用。【方法】分别采用CFTR基因敲除小鼠（CFTR KO）4、8周龄及同周龄野生型对照鼠,分离内脏脂肪组织前脂肪细胞,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测增殖分化转录因子表达变化。采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素（DMI）诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型,采用免疫印迹（Western blot）技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化;并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒,采用免疫印迹,实时荧光定量PCR技术,MTT检测和油红O染色,观察基因干预CFTR后对DMI诱导3T3-L1细胞增殖及分化的影响。采用高脂饮食肥胖小鼠模型,荧光定量PCR技术检测内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子和CFTR基因水平表达。【结果】CFTR基因敲除鼠内脏前脂肪细胞指标Pref-1,增殖因子CyclinD1,分化转录因子PPARγ,C/EBPα表达明显降低（P<0.05）。DMI诱导3T3-L1细胞分化早期,CFTR的表达增加（P<0.05）;转染CFTR沉默病毒后,抑制DMI诱导的... 

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 动物实验和分组
    1.2 主要材料
    1.3 实验方法
        1.3.1 前脂肪细胞的分离
        1.3.2 3T3-L1细胞培养及诱导分化
        1.3.3 免疫印迹法
        1.3.4 实时荧光定量PCR (RT-qPCR)
        1.3.5 CFTR沉默和过表达病毒转染
        1.3.6 MTT检测细胞增殖
        1.3.7 油红O染色检测脂滴形成
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 CFTR基因敲除鼠内脏前脂肪细胞增殖和分化指标下降
    2.2 3T3-L1细胞早期分化中CFTR的表达变化
    2.3 CFTR对3T3-L1细胞早期增殖型分化的影响
    2.4 CFTR对3T3-L1细胞分化末期的影响
    2.5高脂饮食肥胖小鼠模型早期前脂肪细胞CFTR基因表达增强
3 讨论



本文编号：3672049