丙型肝炎NS5A基因的克

发布时间：2022-09-27 19:56

　　丙型肝炎病毒的基因组是一条9.4kb的单股正链RNA分子，NS5A基因片段位于全序列的6258-7600核苷酸位置，氨基酸位点1973-2420，SDS-PAGE测定为P58，在NS5A基因相当于编码产物的C-末端2209-2248aa的区域，称为干扰素敏感决定区（ISDR），被认为是不同基因型的HCV对干扰素治疗反应性差异的分子学基础。我们克隆了NS5A区这部分基因，进行了表达、纯化，研究了NS5A抗原的作用特点，为建立检测HCV NS5A抗体的血清学方法奠定基础。本课题分以下三部分进行： 第一部分：丙型肝炎病毒NS5A片段的克隆 选取中国人输血后丙型肝炎患者血液标本，抽提HCV基因组RNA为模板，根据RT-PCR设计上、下游引物，经PCR扩增获取NS5A基因片段1U1D；经BamllI和KpnI双酶切定向克隆到PMD18-T载体中，构建PMD18-T-1U1D重组质粒。经酶切、PCR、测序鉴定，目的基因克隆结果正确。 第二部分：丙型肝炎病毒NS5A基因片段的原核表达 将PMD18... 

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
英文缩写
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 HCV NS5A基因片段的克隆
    一、 材料
    二、 方法
    三、 结果
    四、 讨论
第二部分 HCV NS5A基因片段的原核表达
    一、 材料
    二、 方法
    三、 结果
    四、 讨论
第三部分 HCV NS5A基因片段的免疫反应性分析
总结
参考文献
附录(一、二、三、四、五)
综述



本文编号：3681521