Ndfip1对神经细胞铁超载损伤的保护作用及机制探讨

发布时间：2022-12-09 19:40

　　目的探讨Ndfip1过表达对神经细胞SH-SY5Y铁超载损伤的保护作用及机制。方法以SH-SY5Y细胞为细胞模型,并成功构建Ndfip1质粒。应用Ndfip1质粒和空质粒分别转染SH-SY5Y细胞,建立实验组和对照组。MTT法检测不同浓度FeSO₄作用下,SH-SY5Y细胞存活率的变化,确定铁超载浓度;Ndfip1质粒转染SH-SY5Y细胞,确定转染效率;Ndfip1质粒和空质粒分别转染SH-SY5Y细胞,MTT法检测2组细胞存活率的变化;应用Calcein AM法处理细胞,荧光显微镜下观察2组细胞的荧光强度,以确定细胞内铁离子的含量;荧光分光光度计检测2组细胞的荧光强度变化,以确定细胞铁摄入能力的改变。结果随着FeSO₄浓度增加,SH-SY5Y细胞存活率逐渐降低。200μmol/L FeSO₄可导致SH-SY5Y细胞存活率明显下降。Ndfip1质粒转染可明显增加SH-SY5Y细胞Ndfip1蛋白表达量,提高SH-SY5Y细胞铁超载损伤后的存活率,减少细胞内铁离子含量及细胞对铁离子的摄入。结论铁超载对神经细胞造成损伤,导... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1细胞及主要试剂
    1.2方法
        1.2.1SH-SY5Y细胞培养
        1.2.2铁超载浓度测定
        1.2.3细胞转染及分组
        1.2.4MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率
        1.2.5蛋白印迹检测Ndfip1蛋白表达量
        1.2.6Calcein AM法检测铁离子
        1.2.7荧光显微镜观察细胞内铁离子含量
        1.2.8荧光分光光度计检测细胞摄入铁的变化
    1.3统计学方法
2 结果
    2.1 不同浓度FeSO4对SH-SY5Y细胞存活率的影响
    2.2 Ndfip1质粒转染效率的测定
    2.3 Ndfip1过表达对SH-SY5Y细胞存活率的影响
    2.4 Ndfip1过表达对SH-SY5Y细胞铁离子含量的影响
    2.5 Ndfip1过表达对SH-SY5Y细胞铁摄入能力的影响
3 讨论
    3.1 铁超载对神经细胞的损伤作用
    3.2 Ndfip1对神经细胞的保护作用
    3.3 Ndfip1的保护作用机制



本文编号：3715259