化学修饰改造RhD（+）稀有血型

发布时间：2022-12-10 00:34

　　本实验的目的是选择适合修饰人红细胞Rh血型的甲氧基聚乙二醇衍生物，将RhD（+）血型改造为RhD（-）血型，为解决临床上RhD（-）血源严重缺乏打下基础。 实验比较了四种不同端基的甲氧基聚乙二醇（mPEG）对RhD（+）血型抗原的修饰效果；观察了mPEG修饰对红细胞结构功能及形态的影响；建立了双水相分离系统将修饰与未修饰的红细胞分开并判定修饰的比例；观察了修饰后红细胞4℃下保存期；分析了mPEG与红细胞膜的结合稳定性；并使用mPEG修饰小鼠红细胞，进行小动物输血实验，观察了mPEG修饰对红细胞在受试动物体内寿命的影响。 实验结果表明在四种mPEG中，以mPEG-BTC的修饰效果最好，在温和、接近于生理的条件下可以将RhD（+）抗原充分遮蔽，表现出RhD（-）红细胞的性质；mPEG修饰没有影响红细胞的结构功能，包括渗透脆性、自身溶血、乙酰胆碱酯酶活性、膜胆固醇含量、ATP、2，3-DPG、红细胞变形性以及红细胞形态等；mPEG修饰红细胞的比例可达80％以上；修饰后红细胞4℃下可保存21天；保存期内mPEG与红细胞膜稳定结合；小鼠的体内实... 

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

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缩略词表
摘要
Abstract
前言
第一章 四种携带不同端基的甲氧基聚乙二醇对RhD(+)血型抗原修饰效果的比较
    1.1 实验材料与仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 mPEG修饰红细胞
        1.2.2 mPEG修饰对红细胞RhD抗原性的影响
        1.2.3 血小板聚集仪检测RhD抗原与D抗体凝集程度
    1.3 实验结果
    1.4 讨论
第二章 mPEG-BTC修饰对RhD(+)红细胞结构功能的影响
    2.1 实验材料与仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 自身溶血性检测
        2.2.2 渗透脆性检测
        2.2.3 乙酰胆碱酯酶活性检测
        2.2.4 胆固醇含量检测
        2.2.5 ATP含量检测
        2.2.6 2,3-DPG含量检测
        2.2.7 变形性检测
        2.2.8 形态检测
    2.3 实验结果
    2.4 讨论
第三章 mPEG-BTC修饰RhD(+)红细胞的比例
    3.1 实验材料与仪器
    3.2 实验方法
    3.3 实验结果
    3.4 讨论
第四章 mPEG-BTC修饰RhD(+)红细胞的保存
    4.1 实验材料与仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 渗透脆性检测
        4.2.2 自身溶血性检测
        4.2.3 乙酰胆碱酯酶活性检测
        4.2.4 变形性检测
        4.2.5 形态检测
        4.2.6 ATP含量检测
    4.3 实验结果
    4.4 讨论
第五章 mPEG-BTC与红细胞膜的结合稳定性
    5.1 实验材料与方法
    5.2 实验方法
        5.2.1 凹形血型鉴定卡检测
        5.2.2 间接抗人球蛋白法检测
        5.2.3 双水相系统检测
        5.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测
    5.3 实验结果
    5.4 讨论
第六章 mPEG-BTC修饰的RhD(+)红细胞在小鼠体内存活
    6.1 实验材料与仪器
    6.2 实验方法
    6.3 实验结果
    6.4 讨论
第七章 mPEG-BTC修饰RhD(+)红细胞在解决疑难输血问题上的初步研究
    7.1 实验材料与仪器
    7.2 实验方法
        7.2.1 抗体筛查
        7.2.2 RBC样品制备
        7.2.3 mPEG-BTC修饰红细胞
        7.2.4 聚凝胺法检测
        7.2.5 间接抗人球蛋白法检测
    7.3 实验结果
    7.4 讨论
全文总结
参考文献
致谢
Rh血型系统
附录: 已发表的相关论文



本文编号：3715689