乙酰胆碱酯酶抗独特型抗体的酶活性研究

发布时间：2023-04-01 00:02

　　目的：研究培养上清及腹水中乙酰胆碱酯酶抗独特型抗体的酶活性为临床有机磷农药中毒的治疗提供一条新途径。 方法：以乙酰胆碱酯酶(AchE)作为抗原免疫动物，制备Ache的单克隆抗体；AchE的单克隆抗体是识别乙酰胆碱酯酶活性中心的单抗，Ache单抗是一种IgG1抗体，先用胃蛋白酶酶切，然后采用SPA亲和层析柱进行提取纯化，利用木瓜蛋白酶酶切抗体，获得纯化的单抗Fab 段(3F3)；采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定Fab片段的活性；再以3F3作为抗原，免疫小鼠，制备抗3F3独特型抗体；通过ELISA法研究该单抗的乙酰胆碱酯酶活性。检测结果组间均数比较采用t检验。 结果：1．AchE 3F3 Fab具有结合抗原(AchE)活性和良好的免疫原性。2．乙酰胆碱酯酶抗体酶具有乙酰胆碱酯酶活性。3。不同稀释度4B9和2B1腹水中单克隆抗体量有明显差异，组间比较P＜0.05，P＜0.01，差异有显著性。 结论：1．乙酰胆碱酯酶(AchE)具有良好的抗原性，可以以此为抗原制备单克隆抗体。2．乙酰胆碱酯酶单抗可经胃蛋白酶水解成为(Fab’)2及Fc’(Fab’)2可作为抗...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
引言
材料与方法
结果
讨论
结论
附表
参考文献
文献综述
参考文献
附录
致谢



本文编号：3776055