人甲胎蛋白基因原核克隆和表达

发布时间：2023-04-22 10:20

　　甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein，AFP)是个70kDa的糖蛋白，在胎儿期由胎肝大量合成，在出生后则表达急剧下降。由于甲胎蛋白在原发性肝癌中也有高表达，既往多将甲胎蛋白用于肝癌的早期诊断和病情监测。最近研究表明，甲胎蛋白有着复杂的生物学功能，具有既能抑制免疫功能间接促进肿瘤细胞生长又能直接促进肿瘤细胞生长的双重作用。同时，甲胎蛋白多肽片断在和MHC分子结合后能被细胞毒性T淋巴细胞(CTL)所识别。因此，作为原发性肝癌的肿瘤相关性抗原(TAA)，甲胎蛋白完全有可能充当肝癌免疫治疗的靶分子。但从人血中提取纯化甲胎蛋白的量小且成本昂贵。本实验通过大肠杆菌等基因工程菌获得重组甲胎蛋白，为进一步研究开发甲胎蛋白抗肿瘤奠定了基础。 1．人AFP基因的获取 用Trizol从人胎肝组织提取mRNA，再逆转录成cDNA。设计并合成AFP1、AFP2、AFP3三对基因引物，两端设计与载体多克隆位点匹配的酶切位点BamH Ⅰ、Hind Ⅲ，以cDNA为模板分别作PCR，分别获取AFP1、AFP2、AFP3基因片段。各PCR产物长度：AFP1为588bp；AFP2为678bp；AF...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 论文正文 人甲胎蛋白基因原核克隆和表达
    前言
    实验材料与设备
    实验方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
四、 综述 肿瘤疫苗临床研究进展
五、 致谢



本文编号：3797450