层粘连蛋白α 5 LG1-3、LG2、LG3的cDNA克

发布时间：2023-05-07 06:02

　　层粘连蛋白是哺乳动物细胞基质中一种主要糖蛋白，是基质的主要功能成分，也是胚胎发育中出现 最早的细胞外基质的成分。它在控制细胞的增殖、参与细胞的迁移，控制细胞分化，促进创伤修复方面起着传递信号的作用。层粘连蛋白与Ⅳ型胶原蛋白结合形成三维精细结构，赋予组织以韧性、弹性、保水性及对机械力的缓冲性，并为细胞提供生存及从事活动的微环境。层粘连蛋白是由α，β和γ构成的三聚体。α₅在成年组织中广泛表达，在胚胎发育过程中，α₅发挥着重要作用。 本实验采用RT-PCR技术，应用高保真DNA聚合酶从小鼠心脏，肾等中扩增出LG1-3，LG-2，LG3三个基因片段，经琼脂糖凝胶电泳，在接近1.6KB，0.5KB，0.5Kb处出现特异片段，并将其连入pMD18-T载体中，转入JM109细胞中，提取质粒，采用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切鉴定，获得了1.6KB，0.5KB，0.5Kb的片段，将鉴定理想的质粒进行测序，获得正确结果。 将克隆载体上LG1-3，LG-2，LG3三个基因片段用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切，回收酶切产物，同时将原核表达载体pET...

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
前言
实验一 层粘连蛋白α5 LG1-3、LG2、LG3cDNA的克隆、表达
    1. 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 实验流程
        1.3 方法
    2. 结果与讨论
        2.1 总RNA的提取
        2.2 RT-PCR
        2.3 PCR产物克隆
        2.4 克隆质粒鉴定
        2.5 克隆质粒的序列分析
        2.6 表达载体目的片段的酶切
        2.7 工程菌的诱导表达
    3. 小结
实验二 LG1-3目的蛋白多克隆抗体的制备
    1. 材料与方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2. 结果与讨论
        2.1 包涵体的制备
        2.2 多克隆抗体制备
    3. 小结
结论
参考文献
致谢
英文摘要
个人简历



本文编号：3810425