普氏立克次体120kDa表面蛋白基因的克隆与表达及重组蛋白抗原性的研究

发布时间：2023-10-01 21:33

　　普氏立克次体(Rickettsia prowazekii,R.p)是专性细胞内寄生的革兰氏阴性菌，流行性斑疹伤寒的病原体。普氏立克次体种特异性的120kDa表面蛋白是发挥主要免疫作用的表面抗原，是发展流行性斑疹伤寒的诊断制剂和亚单位疫苗的合适靶蛋白。本研究旨在克隆与表达普氏立克次体的120kDa表面蛋白抗原特异性较好的N端部分和免疫反应性较好的C端部分的基因片段，并对表达的重组蛋白的抗原性进行研究。 采用PCR方法，从普氏立克次体基因组中扩增到120kDa表面蛋白抗原N端基因片段和C端基因片段，将两个基因片段分别与原核表达载体pQE30连接，构建重组质粒pQE30／N和pQE30／C。将重组质粒转化大肠杆菌，并用IPTG诱导转化的大肠杆菌表达目的蛋白。SDS-PAGE鉴定pQE30／N转化菌表达的N端重组蛋白的分子量为26kDa，pQE30／C转化菌表达的C端重组蛋白的分子量为67kDa。 免疫印迹分析证明N端重组蛋白和C端重组蛋白均能与普氏立克次体免疫血清特异反应，N端重组蛋白仅与立氏立克次体免疫血清发生交叉反应，C端重组蛋白则与立克次体属的多种立克次体免疫血清发生交...

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
绪论
第一部分 普氏立克次体120kDa表面蛋白N端基因和C端基因的克隆及原核表达
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
第二部分 普氏立克次体120kDa表面蛋白N端和C端重组蛋白的免疫原性研究及比较
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
第三部分 普氏立克次体120kDa表面蛋白N端和C端重组蛋白的抗原特异性的研究
    1 材料和方法
    2 结果
    3 讨论
结论
参考文献
附录
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致谢



本文编号：3849457