SIV与SHIV的构建及SIV Gag蛋白的表达纯化和单抗研究

发布时间：2023-11-09 20:00

　　SHIV是利用基因重组技术构建的SIV／HIV嵌合病毒，SHIV被广泛用于HIV基因功能和致病机理研究，SHIV／恒河猴还可做为HIV疫苗研究的动物模型。国外科学家自上世纪80年代末开始构建SHIV，目前已有多株SHIV问世，其中部分致病性较强的毒株已经在抗HIV抗体中和活性评价和HIV疫苗攻毒实验中得到了初步应用；但目前国内还没有SHIV的构建报道。 在本研究中，首先利用从国外实验室获得的含有SIVmac239 5′端1～6707个碱基的质粒p239SpSp5′和含有SIVmac239 3′端6702～13068个碱基的质粒p239SpE3′，经SphI酶切后连接获得完整的SIVmac239 DNA分子克隆。在分析了HIV-1 B模板中的tat／rev／env基因序列之后，以该序列内部的HindⅢ酶切位点为界，采用巢式PCR方法分两段扩增了HIV-1 B的tat／rev／env基因。以分段扩增产物的酶切连接产物为模板，重新设计引物扩增得HIV-1 B tat／rev／env全长序列，经NcoI和SphI双酶切后，替换到p239SpE3′中，筛选鉴定得阳性克隆子。然后，采取与构...

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 SIVmac239provirus与SHIV的构建
    材料与方法
    结果
    讨论
    第一部分 小结
第二部分 SIVmac239的核心抗原的表达纯化和单抗制备
    材料与方法
    结果
    讨论
    第二部分 小结
参考文献
附录1:文献综述
附录2:缩略词表
致谢



本文编号：3861925