艰难梭菌毒素A 3｀末端重复区域基因片断的PCR克隆及其对临床应用的意义

发布时间：2023-12-12 19:46

　　背景/目的：艰难梭菌（Clostridium difficile）是抗生素相关性腹泻 （AAD）和伪膜性肠炎（PMC）的主要致病因子。此类疾病的发生与抗生 素的广泛应用和抗肿瘤的化疗密切相关。抗生素或抗肿瘤药物破坏正常 肠道菌群的微生态平衡，内源性或外源性艰难梭菌产毒株在肠道定植， 释放毒素A和毒素B，造成肠道粘膜损害及炎症。AAD的治疗包括停用 抗生素及补液，稍重者可口服甲硝唑，而严重感染如伪膜性肠炎需服用 万古霉素治疗。但由于此种疾病较高的复发率（大于25％）以及逐渐增 多的发病率和致死率，进行免疫防治和基因疫苗治疗的研究十分必要。 另外对于该菌感染，现检测手段废时费力，而基因探针诊断的优点显而 易见。该菌产生的毒素A既是肠毒素，又是一种细胞毒素，而毒素B是 在毒素A损伤粘膜细胞的基础上产生作用，因此毒素A成为研究重点。 编码毒素A的基因由八千多个碱基构成，在其近3’端有大量的重复单位， 已证明为功能区域（编码粘合蛋白）。本实验的目的在于从毒素A的功能 区域进行基因片断的克隆并序列分析以作为进一步治疗研究的基础以及 探讨其临床快速检测的意义。 方法：（1）、收集临床腹泻病人...

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 艰难梭菌的分离培养和生物学特性
    引言
    材料和方法
    结果
        一、 培养和涂片镜检
        二、 细菌的生化鉴定
        三、 传代、保种和复苏
    讨 论
第二部分 毒素A基因3'末端重复区域基因片断的克隆
    引言
    材料和方法
    结果
        一、 PCR扩增产物的电泳分析
        二、 基因片断测序及序列分析
        三、 蛋白质二级结构的预测和分析
    讨 论
总 结
参考文献
文献综述
致 谢



本文编号：3873527