伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6抗血清对原虫有性阶段发育抑制作用的研究

发布时间：2024-02-15 14:41

　　目的:探讨伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6(PPP6)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PPP6蛋白全长编码基因并克隆入p ET32a(+)载体。IPTG诱导PPP6重组蛋白的表达,纯化后皮下免疫小鼠,收集抗PPP6免疫血清。ELISA和Western blot检测抗PPP6免疫血清效价和特异性。实验观察免疫血清对配子体出丝、动合子和囊合子发育的影响。结果:成功诱导PPP6重组蛋白表达,抗PPP6免疫血清抗体效价为1∶3 200;与对照组相比,抗PPP6免疫血清可显著抑制配子体出丝(P<0. 000 1);动合子数目和动合子转化率分别显著降低65. 3%和42. 07%(P<0. 000 1);抗PPP6血清1∶5倍稀释时,囊合子形成数量减少68. 91%(P<0. 000 1)。结论:PPP6蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。抗PPP6免疫血清具有明显的传播阻断效果。

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【部分图文】：

图1PPP6重组蛋白表达检测Fig．1ExpressionofrecombinantPPP6protein

动合子转化率观察显示，1∶5倍稀释的抗PPP6免疫血清可显著抑制动合子转化率，使动合子转化率下降42.07%(P＜0.0001，图3B)。上述结果提示抗PPP6免疫血清可体外抑制动合子的形成和分化。2.4抗PPP6免疫血清对囊合子形成数量的影响采用100μl抗PPP6免疫血清尾静....

图2抗PPP6免疫血清对雄配子体出丝的影响Fig．2Effectofanti-PPP6serumonmalegametocyteex-

数量。本研究发现，吸食抗PPP6免疫血清过继转移组小鼠血液的按蚊胃内囊合子形成显著减少图1PPP6重组蛋白表达检测Fig．1ExpressionofrecombinantPPP6proteinNote:A.Thecoomassiebrilliantbluestainingresu....

图3抗PPP6血清对动合子数目和形成率的影响Fig．3Effectofanti-PPP6serumonookinetenumberand

图3抗PPP6血清对动合子数目和形成率的影响Fig．3Effectofanti-PPP6serumonookinetenumberandookineteconversionrateNote:A.Theeffectofanti-PPP6serumonookinetenumber.B....

图4抗PPP6血清对囊合子形成的抑制作用Fig．4Inhibitoryeffectofanti-PPP6serumonoocystsfor-

图3抗PPP6血清对动合子数目和形成率的影响Fig．3Effectofanti-PPP6serumonookinetenumberandookineteconversionrateNote:A.Theeffectofanti-PPP6serumonookinetenumber.B....

本文编号：3899914