含禽流感病毒血凝素蛋白VSV假病毒制备

发布时间：2024-02-21 21:39

　　目的构建含有H6N2型禽流感病毒血凝素蛋白(HA)的疱疹口炎病毒(VSV)。方法以H6N2亚型禽流感病毒互补脱氧核糖核酸(cDNA)为模板,扩增HA基因,并与pcDNA3.1+载体连接;使用VSVΔG*-G病毒感染制备VSVΔG*-HA假病毒,并对其血凝活性进行测定。结果成功构建重组表达载体pcDNA3.1HA;HA蛋白表达于293T细胞;荧光显微镜证实VSVΔG*-HA假病毒包装成功;活性试验显示VSVΔG*-HA假病毒具有与禽流感病毒相似的血凝活性。结论含有H6N2型禽流感病毒HA蛋白的VSV假病毒安全、可靠,为进一步对禽流感病毒受体等研究及筛选抗流感病毒的药物提供了技术支持和思路。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂及仪器
    1.2 细胞培养
    1.3 PCR扩增及HA基因片段的鉴定
    1.4 重组质粒的扩增鉴定
    1.5 假病毒制备
    1.6 Western blot分析
    1.7 假病毒血凝效价的检测
2 结果
    2.1 重组质粒的构建
    2.2 VSV-ΔG*-HA假病毒基本特征
    2.3 Western blot检测
    2.4 VSV-ΔG*-HA假病毒的血凝活性
3 讨论



本文编号：3905934