细胞自噬缓解氧-糖剥夺诱导原代培养小鼠脑皮质神经元缺血损伤
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【摘要】:目的在离体细胞水平,探讨氧-糖剥夺(OGD)致原代培养小鼠脑皮质神经元缺血损伤过程中,细胞自噬的变化情况和可能作用。方法出生24 h内C57BL/6J乳鼠脑皮质神经元原代培养7 d后,分为常氧(Nor.)、15、30、60、90和120 min OGD后24 h复糖复氧等6组,每组n=6;免疫印迹(Western blot)法检测细胞自噬相关蛋白Beclin-1表达和LC3Ⅱ/Ⅰ比值;借助MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,检测神经元的损伤;用细胞自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1(Baf A1100 nmol/L)抑制自噬后,观察神经元的损伤。结果与对照组相比,随OGD时间的延长,自噬相关蛋白Beclin-1表达水平和LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著升高,30 min达到峰值,之后略有回降(P0.05);在OGD处理30和60 min致使神经元显著损伤的基础上,细胞自噬抑制剂Baf A1可明显加重60 min OGD处理神经元的损伤和提高LC3Ⅱ/Ⅰ的比值(P0.05)。结论 OGD可诱发原代培养小鼠脑皮质神经元自噬发生,且细胞自噬可缓解OGD处理皮质神经元的缺血损伤。
【作者单位】: 首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院;首都医科大学附属北京朝阳医院神经内科;
【关键词】: 原代培养脑皮质神经元 氧-糖剥夺(OGD) 细胞自噬 巴弗洛霉素A(BafA) 缺血性损伤
【基金】:国家自然科学基金(31171147,31200895,31471142) 北京市自然科学基金(7141001,7144188,7132070) IATN国际合作种子基金(PXM2014-014226-000006) 2013年北京市新世纪百千万人才工程培养经费B类资助(北京市人事局第08-016号)
【分类号】:R363
【正文快照】: 自噬是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖性降解途径,并被认为是细胞进行自我保护的一种重要机制[1]。关于自噬在脑缺血和缺血再灌注过程中的作用一直存在争议,一些研究者认为自噬在脑缺血损伤中起到保护作用;而另一些学者则认为自噬加重脑缺血损伤。究其原因,可能主要与
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