去整合素echistatin对糖尿病兔后发性白内障模型中ILK介导信号通路的影响

发布时间：2017-06-18 12:20

  本文关键词：去整合素echistatin对糖尿病兔后发性白内障模型中ILK介导信号通路的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景后发性白内障(posterior capsular opacification, PCO)作为白内障术后最常见的并发症,在糖尿病患者中发病率更高。糖尿病性PCO不仅导致术后已恢复视力的再次下降,同时也影响糖尿病患者眼底检查和视网膜光凝及玻璃体手术等治疗。Echistatin作为去整合素家族的一员,课题组前期研究发现,10.0mg·L-1 echistatin可抑制糖尿病兔晶状体摘出术后晶状体上皮细胞(lens epithelial cells, LECs)的增殖、迁移和上皮-间质转分化,并发现糖尿病兔术后随着时间的推移PCO形成逐渐加重,术后10天(10d)LECs开始发生增殖,术后6周(6w)时达到高峰。但echistatin抑制糖尿病兔PCO形成的分子机制目前仍不清楚。目的观察去整合素echistatin对糖尿病兔PCO形成过程中信号因子ILK (Integrin-Linked Kinase)及其下游信号通路PI3-K/Akt和ERKl/2的影响,从分子水平上探讨echistatin的抑制作用。方法(1)应用四氧嘧啶(ALX)耳缘静脉注射建立糖尿病兔模型(n=56),随机分组并行晶状体摘出术(右眼),术毕前房分别注入0.2mL高压灭菌蒸馏水(对照组,n=28),0.2mL 10. Omg·L-1 echistatin溶液(echistatin干预组,n=28)；每组又分为10d和6w 2个时间点(n=14/每组)。(2)术后术眼予抗炎、抗感染及扩瞳治疗,并于裂隙灯显微镜下观察各组术眼角膜、前房及PCO分级情况。(3)术后10d及6w摘取术眼,制成蜡块,应用HE法观察晶状体后囊膜上LECs的变化及角膜和视网膜情况。(4)术后10d及6w摘取术眼,分别应用RT-PCR法、western blot法及免疫组化法检测术后晶状体后囊膜上ILK基因及蛋白表达情况。 (5)术后10d及6w摘取术眼,取下后囊膜,应用western blot法检测Akt和ERK1/2蛋白磷酸化变化情况。结果(1)术眼观察：术后两组糖尿病兔眼角膜水肿和前房炎症比较无明显差异(P0.05)。 (2)PCO分级：术后10d,两组糖尿病兔眼PCO分级比较无明显差异(P=-0.057),但echistatin干预组PCO 1级眼数(3眼)明显少于对照组(8眼)；术后6w,echistatin干预组PCO分级较对照组明显降低(P=-0.001)。(3)组织病理形态观察：术后10d及6w,echistatin干预组后囊膜上LECs的增殖及迁移情况均明显低于对照组；echistatin干预组的角膜及视网膜在术后早期及晚期结构均保持完整,未见药物引起的明显毒性损伤反应。 (4)ILK表达变化：术后10d及6w,echistatin干预组ILK蛋白表达较对照组明显下降(P=0.000和0.016),ILK mRNA表达亦明显低于对照组(P=0.005和0.008 vs echistatin干预组)。(5)Akt和ERK1/2表达变化：术后10d及6w,echistatin干预组Akt和ERKl/2磷酸化水平受到抑制,p-Akt/Akt及p-ERK/ERK表达较对照组明显下降(P0.05)。结论去整合素echistatin对糖尿病兔后发性白内障的发生和发展有一定的抑制作用,其发生机制可能与echistatin抑制ILK表达并阻断其下游信号通路PI3-K/Akt和ERK1/2传导有关。
【关键词】：echistatin ILK信号通路 后发性白内障 糖尿病兔
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R776.1;R-332
【目录】：

• 个人简历3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-26
• 结果26-28
• 讨论28-33
• 结论33-34
• 参考文献34-41
• 附图41-45
• 中英文缩略词对照45-46
• 综述：整合素信号通路与后发性白内障的研究现状46-57
• 参考文献53-57
• 致谢57-58
• 攻读学位期间发表的学术论文58

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本文编号：459279