免疫磁珠富集与SYB RGreen荧光定量PCR技术联合检测水体中甲肝病毒

发布时间：2017-06-29 09:17

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【摘要】：本实验旨在建立一种免疫磁珠与SYBR Green荧光定量PCR技术联合检测水体中甲肝病毒的方法。通过制备特异性甲肝病毒免疫磁珠,优化病毒核酸提取方法,建立了免疫磁珠富集病毒和荧光定量PCR检测水体中甲肝病毒的方法。研究结果显示,1mg免疫磁珠与75μg甲肝病毒单克隆抗体偶联时,有最大抗体偶联量;该偶联后的磁珠富集甲肝病毒效率为92.87%。研究结果还显示,SYBR Green荧光定量PCR检测的标准曲线线性关系良好(R~2=0.999),检测极限低至9.27×10~1拷贝/μL。本研究结果表明,免疫磁珠与SYBR Green荧光定量PCR技术结合,具有特异性强、灵敏度高、可信度强、简便快捷的优点,本方法对水体中甲肝病毒污染状况检测与评价提供了有力的技术支持。
【作者单位】： 江西农业大学动物群发性疾病监测和防治研究所;中国科学院武汉病毒研究所;
【关键词】： 免疫磁珠 荧光定量PCR 甲肝病毒
【基金】：国家科技支撑计划(2013BAK12B05)
【分类号】：X52;R373.2
【正文快照】： 甲肝病毒(Hepatitis A virus,HAV)是一种小共患肠道病毒之一。甲肝病毒高浓度存在于感染者RNA病毒科嗜肝病毒属的RNA病毒,为常见的人畜的粪便中,早在1973年,Feinslone利用免疫电镜技 术在患病者的粪便样品中观测到了甲肝病毒[1],它 多功能磁分离器(上海奥润微纳新材料科技有

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1 姚t，

本文编号：497357