兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化的不同培养方法

发布时间：2017-09-01 15:16

  本文关键词：兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化的不同培养方法

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【摘要】：背景:目前传统骨髓间充质干细胞的培养方法是应用异种血清为培养基,但其存在种间疾病传播、潜在免疫排斥反应甚至是伦理学争议等问题;且与卫生部公布的《组织工程化组织移植治疗技术管理规范》的要求相违背。自体富血小板血浆是生物自体的全血提取物,内含多种且含量丰富的生长因子。目的:使用自体富血小板血浆替代传统异种血清,探讨其对兔骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞的影响,方法:从兔髂后上棘穿刺抽出8 mL骨髓并加肝素抗凝,密度梯度离心富集骨髓间充质干细胞,分为自体富血小板血浆组、胎牛血清组,分别加入含10%自体富血小板血浆、体积分数10%胎牛血清。在传至4代时将自体富血小板血浆组和胎牛血清组细胞各自分为实验组和对照组,实验组对培养及成分进行改变;对照组培养基不变。通过生长曲线测定各代细胞的增殖情况;通过对各组细胞进行碱性磷酸酶活性测定,判断其成骨分化状况。结果与结论:骨髓间充质干细胞生长曲线可见各代细胞增殖良好。对第4代各组细胞进行碱性磷酸酶活性检测,培养第12天,第4代自体富血小板血浆实验组及胎牛血清实验组的碱性磷酸酶活性均显著高于其相应对照组;自体富血小板血浆组对照组、实验组碱性磷酸酶活性显著高于胎牛血清组的对照组、实验组,差异有显著性意义(P0.01)。提示使用自体富血小板血浆替代异种血清培养骨髓间充质干细胞是一种安全可靠、操作简单、纯度活性高的诱导骨髓间充质干细胞的成骨分化方法。
【作者单位】： 冀中能源邢台矿业集团总医院急诊科;天津市第四中心医院神经外科;
【关键词】： 干细胞 间质干细胞 富血小板血浆 幼牛血清 骨髓干细胞 自体富血小板血浆 骨髓间充质干细胞 胎牛血清 生长曲线
【分类号】：R329
【正文快照】： 文章亮点:1实验的特点在于:采用来源广泛的骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化;对兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导分化的多种方法进行比较;使用自体富血小板血浆替代异种血清培养骨髓间充质干细胞。2实验结果显示,使用自体富血小板血浆替代异种血清培养骨髓间充质干细胞是

【参考文献】

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本文编号：772831