中国林蛙皮肤抗菌肽的分离纯化及生物活性研究

发布时间：2017-09-02 09:20

  本文关键词：中国林蛙皮肤抗菌肽的分离纯化及生物活性研究

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【摘要】：抗菌肽(Antimicrobial peptides)也称为肽抗生素,是一类小分子多肽,广泛分布于生物体内。两栖类动物皮肤湿润、裸露,可分泌大量具有抑菌活性的物质,其中以抗菌肽为主。本研究旨在从中国林蛙皮肤分泌的活性物质中提取并进一步分离纯化出新型的抗菌肽,并对其生物学活性进行研究,为两栖类动物抗菌肽的研究奠定基础。实验蛙间断性电刺激,超纯水收集产生的分泌物,反相高效液相色谱对分泌物分离纯化,将金黄色葡萄球菌(ATCC25923)作为活性试验指示菌进行抑菌效果检测,获得1种抑菌效果较强的抗菌肽,经MALDI-TOF MS质谱鉴定,该抗菌肽纯度达95%以上,序列鉴定表明该抗菌肽的氨基酸序列为FLPFFAACAITKKC(8和14位之间形成二硫键),将其命名为AMP-1。利用多肽固相合成中国林蛙抗菌肽AMP-1、分离纯化,经抑菌活性检测及质谱鉴定,获得目的抗菌肽AMP-1。MIC结果表明:AMP-1对金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和大肠杆菌(ATCC25922)有抑制作用,对多重耐药菌株也有一定的抑制效果;溶血试验结果表明:AMP-1最高浓度时溶血率仅为1.108%;抗肿瘤活性试验结果显示:AMP-1对人乳腺癌细胞MCF-7的生长有很强的抑制作用,最高浓度时抑制率可达75.8%,且最低浓度时仍有抑制作用;抗弓形虫活性试验结果显示:AMP-1对弓形虫的抑制作用随浓度的增大而增强,随着时间的延长也会增强。作用72h,50μg/mL的AMP-1对弓形虫的抑制率高达72.5%,而最低浓度时对弓形虫仍具有抑制作用。
【关键词】：抗菌肽 中国林蛙 分离纯化 抑菌活性
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R3411;Q51
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 英文缩略词表7-8
• 前言8-9
• 第一章 文献综述9-18
• 1.1 抗菌肽简介9-10
• 1.2 起源10
• 1.3 抗菌肽的分类10-13
• 1.4 抗菌肽的生物活性13-14
• 1.5 抗菌肽抑制寄生虫的作用机理14-15
• 1.6 抗菌肽的应用15-17
• 1.7 展望17
• 1.8 本研究的目的及意义17-18
• 第二章 中国林蛙皮肤抗菌肽的分离纯化及序列鉴定18-32
• 2.1 材料18-19
• 2.2 方法19-22
• 2.3 结果22-30
• 2.4 讨论30-31
• 2.5 小结31-32
• 第三章 中国林蛙皮肤抗菌肽生物学活性研究32-44
• 3.1 材料32-33
• 3.2 方法33-36
• 3.3 结果36-41
• 3.4 讨论41-42
• 3.5 小结42-44
• 第四章 结论44-45
• 参考文献45-51
• 作者简介51-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 岳昌武;莫宁萍;刘坤祥;凌锌;曾霓;;抗菌肽的结构特点·作用机理及其应用前景[J];安徽农业科学;2008年05期

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本文编号：777701