抗弓形虫SAG2蛋白单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

发布时间：2017-09-07 06:41

  本文关键词：抗弓形虫SAG2蛋白单克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

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【摘要】：为制备抗弓形虫SAG2蛋白的单克隆抗体(McAb),用纯化的rSAG2蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA方法筛选稳定分泌高效价McAb的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备单抗。用ELISA方法测定其效价;单克隆抗体类型鉴定试纸条鉴定其类型;Western-blot和IFA试验进行特异性鉴定。结果显示,筛选出2株能稳定分泌抗SAG2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为5E2、2A8。间接ELISA测定其效价分别为1∶256 000、1∶128 000;2株单克隆抗体亚型均为IgG1型,轻链均为κ链;Western-blot与IFA试验表明,这2株McAb均能够特异性识别天然构象的SAG2蛋白,并且进一步说明此蛋白是位于弓形虫膜表面的蛋白。成功获得了具有较高特异性及敏感性的抗SAG2蛋白的单克隆抗体,并能特异性识别天然构象的SAG2蛋白,为弓形虫病免疫诊断及基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。
【作者单位】： 甘肃畜牧工程职业技术学院;中国农业科学院上海兽医研究所;
【关键词】： 弓形虫 SAG 单克隆抗体
【基金】：公益性行业(农业)科研专项(200803017)
【分类号】：R392
【正文快照】： 弓形虫病是一种呈世界性分布且严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。孕妇感染弓形虫后,可导致流产、畸胎、死胎或智力发育不全;免疫抑制或免疫缺陷患者感染弓形虫后,可引起弓形虫性脑炎、弓形虫性视网膜脉络炎等,严重者可致死。此外,弓形虫也可引起家畜的高热、呼吸系统及消

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 言慧,李华,周晓红,吴昆,陈晓光;截短形式弓形虫SAG1抗原在大肠杆菌中的可溶性高效表达、纯化及免疫反应性鉴定[J];第一军医大学学报;2004年04期

2 魏庆宽;李瑾;付婷霞;崔勇;柏雪莲;王用斌;黄炳成;韩广东;刘克义;;抗弓形虫P30单克隆抗体的制备及其抗虫作用观察[J];现代免疫学;2006年06期

3 聂福旭;蒋蔚;王权;陈永军;胡永浩;;弓形虫膜表面抗原SAG2蛋白的高效表达及免疫活性分析[J];生物技术通报;2010年04期

4 傅翠娥，余毅，陈彩华，，杨旭明，王蓉，张乐，丁贞英，曾小军，刘莉，许雪萍，张群;循环抗原阳性对弓形虫病诊断价值的研究[J];中国寄生虫病防治杂志;1995年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杨培梁,陈晓光,王元占,李华,周晓红,吴q,言慧;具有免疫反应性的弓形虫多表位抗原在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定[J];第一军医大学学报;2005年05期

2 李华;言慧;陈白虹;刘敏;陈晓光;;弓形虫SAG1的高密度发酵表达、纯化及免疫反应性鉴定[J];南方医科大学学报;2008年07期

3 任庆娥;周春香;菅复春;冯超;张龙现;;弓形虫病分子诊断技术研究进展[J];中国畜牧兽医;2009年05期

4 米锐;李亚洁;孟楠;孙永欣;李学军;温志新;李树英;;柞蚕微孢子虫孢壁蛋白多克隆抗体的制备及鉴定[J];蚕业科学;2013年05期

5 郭瑞;;对虾白斑综合症病毒囊膜蛋白VP28表达载体的构建及在重组大肠杆菌中的表达[J];河套大学学报;2007年04期

6 杨培梁;李华;周晓红;彭鸿娟;吴q;陈晓光;;弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用[J];热带医学杂志;2007年09期

7 邹梦晨;言慧;吴q;陈晓光;李华;;用重组SAG1抗原检测弓形虫抗体[J];热带医学杂志;2009年06期

8 秘文婷;姚硕;钟志刚;杨培梁;吴q;陈晓光;;弓形虫复合基因SAG1-BAG1的构建、表达及重组抗原的免疫反应性分析[J];热带医学杂志;2012年05期

9 聂福旭;蒋蔚;王权;陈永军;胡永浩;;弓形虫膜表面抗原SAG2蛋白的高效表达及免疫活性分析[J];生物技术通报;2010年04期

10 张建伟;王海龙;殷国荣;刘转转;刘晋平;赵丰;;弓形虫SAG1基因功能片段的克隆、表达与抗原性分析[J];山西医科大学学报;2009年06期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 王权;蒋蔚;陈永军;聂福旭;胡永浩;;弓形虫膜表面抗原SAG2蛋白的高效表达及免疫活性分析[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 李华;弓形虫病和广州管圆线虫病的免疫学诊断研究[D];第一军医大学;2005年

2 杨培梁;弓形虫多表位基因的疫苗研究及其重组抗原在免疫诊断中的应用[D];第一军医大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 李忠信;FLAG标签单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究[D];河南工业大学;2010年

2 鲁陈;实时荧光定量PCR检测法在孕妇弓形虫感染检测中的优势及临床应用[D];南昌大学;2010年

3 荆振宇;基于rROP18-rSAG2犬弓形虫ELISA检测技术及药物筛选研究[D];中国农业科学院;2011年

4 言慧;具有特异免疫反应活性的弓形虫重组SAG1抗原及其单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用[D];第一军医大学;2004年

5 王际平;弓形虫P30抗原单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[D];南华大学;2007年

6 任庆娥;河南省部分地区猪弓形虫分离株基因型研究和弓形虫RH株的细胞培养[D];河南农业大学;2009年

7 郭凯;弓形虫缓殖子期特异抗原BSR4的克隆、表达、纯化与鉴定[D];蚌埠医学院;2011年

8 周小伟;家蚕微孢子虫（Nosema bombycis）功能基因组研究[D];西南大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 曾方银,刘国章,陈晓光,李文盛,王s阏

本文编号：808007