THP-1单核细胞不同转染方法的比较

发布时间：2017-09-07 08:10

  本文关键词：THP-1单核细胞不同转染方法的比较

  更多相关文章： 单核细胞 转染 质粒 组织构建 组织工程 转染效率 THP-单核细胞 DEAE-葡聚糖 脂质体 国家自然科学基金

【摘要】：背景:人单核细胞系THP-1细胞是典型的悬浮细胞系,其转染并瞬时表达外源蛋白比一般贴壁细胞相对困难。其中DEAE-葡聚糖介导的细胞转染方法虽然建立较早,但在国内应用很少。目的:采用不同质粒转染方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒(pEGFP-N1)转染人THP-1单核细胞,以获得较高转染效率的方法。方法:分别采用DEAE-葡聚糖、Lipofectamine 2000、FuGENE 6、梭华-Sofast转染试剂不同方法介导质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒进行转染,测定不同方法的转染效率、及其对细胞活力的影响。结果与结论:荧光显微镜下观察及流式细胞仪检测结果均显示DEAE-Dextran介导的转染效率最高,Lipfectamine 2000脂质体次之,FuGENE 6和梭华-Sofast则明显低于前二者。将质粒绿色荧光蛋白真核表达质粒体外成功转染人THP-1单核细胞中,通过优化转染方法提高转染效率、降低对细胞活力的影响。
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病科;
【关键词】： 单核细胞 转染 质粒 组织构建 组织工程 转染效率 THP-单核细胞 DEAE-葡聚糖 脂质体 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30471921) 湖北省自然科学基金面上项目(2013CFB073)~~
【分类号】：R3416
【正文快照】： 0引言Introduction人单核细胞系THP-1细胞是典型的悬浮细胞系,其转染并瞬时表达外源蛋白比一般贴壁细胞相对困难,可能是因为细胞间膜结构的差异,但目前在分子水平上对其机制并无合理解释[1-3]。细胞转染的方法主要有电穿孔、磷酸钙、脂质体载体、DEAE-葡聚糖介导、基因显微注

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 Qian Xiong;Yadong Yang;Hai Wang;Jie Li;Shaobin Wang;Yanming Li;Yaran Yang;Kan Cai;Xiuyan Ruan;Jiangwei Yan;Songnian Hu;Xiangdong Fang;;Characterization of miRNomes in Acute and Chronic Myeloid Leukemia Cell Lines[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2014年02期

2 王秦;成凤;张维理;匡文斌;李朴;董晋豫;梁勤东;涂植光;;重组腺病毒Ad5F35-IL-12感染不同单核-巨噬细胞的研究[J];细胞与分子免疫学杂志;2013年02期

3 李蕾;张爱华;刘凌波;闭兰;王利;赵亚杰;邹萍;;抑制mll-af9融合基因表达对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响[J];中国实验血液学杂志;2008年02期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 马杰;房林;;纳米粒子靶向治疗乳腺癌研究进展[J];上海交通大学学报(医学版);2010年03期

2 潘俊杰;施海明;罗心平;李剑;梁旺;张进;马端;;U937单核细胞几种不同转染方法的比较[J];复旦学报(医学版);2010年05期

3 李亚;付强;张俊波;张辉;陈创夫;;巨噬细胞RAW264.7不同转染方法的比较[J];生物技术;2014年02期

4 张晓燕;高永良;;抗肿瘤药物脂质体的研究进展[J];中国新药与临床杂志;2009年05期

5 杨景明;邓为民;;保乳术后复发性乳腺癌的治疗进展[J];医学综述;2011年15期

6 张玉娟;李华文;常国强;张洪菊;王建;蔺亚妮;周家喜;李庆华;庞天翔;;沉默DOT1L基因对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响[J];中国实验血液学杂志;2013年04期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 刘春杰;携带KGF基因的减毒沙门氏菌（SPK）的构建及其治疗作用[D];天津大学;2012年

2 潘振华;微管蛋白抑制剂SUD包合物脂质体的制备及其初步药效学和药动学研究[D];河北医科大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 耿然s，

本文编号：808382