CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶快速检测方法的建立

发布时间：2017-09-09 07:03

  本文关键词：CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶快速检测方法的建立

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【摘要】：目的:建立一种CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的快速检测方法。方法:采用梅花形双向琼脂扩散实验检测酶蛋白与抗体反应最适比;根据双抗体夹心法原理设计酶联免疫吸附实验(ELISA)检测试剂盒;平行测定30次BL21-pET-28a-CTX-M-38转化子表达产物,检测批内变异;分别采用所建立的ELISA法与PCR技术对146株产ESBLs大肠埃希菌进行检测,评价方法特异性;对27株非产CTX-M-38型产酶大肠埃希菌进行检测,计算假阳性率;对产CTX-M-38型ESBLs菌株不同时间段培养液进行检测,明确最适检测时间。结果:抗体与4 h培养物反应最适比为1∶64;批内检测结果变异系数为1.525%;PCR及所建立的ELISA法检测产CTX-M-38型ESBLs菌株的检出率分别为4.11%和7.53%(χ2=2.286,P=0.131);交叉反应中存在假阳性现象(1/27);产酶菌株培养4 h后进行ESBLs检测较为合适。结论:所建立的方法适用于临床产CTX-M-38型ESBLs菌株的检测。
【作者单位】： 郑州大学第一附属医院检验科;
【关键词】： CTX-M- 超广谱β-内酰胺酶 酶联免疫吸附实验
【基金】：河南省医学科技攻关项目2011020014
【分类号】：R392
【正文快照】： 目前,产CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶(ex-tended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)菌株在临床上已有报道。基于其广泛耐药性,建立一种快速检测方法对于有效控制该类产酶菌株感染以及遏制耐药性扩散非常重要。产酶菌株的常用检测方法主要有表型及基因型检测两种,前者检测周期长

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本文编号：818983