纳米银离子对铜绿假单胞菌生物被膜结构的影响的分析

发布时间：2017-09-09 14:49

  本文关键词：纳米银离子对铜绿假单胞菌生物被膜结构的影响的分析

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【摘要】：目的探讨纳米银离子对细菌生物被膜(biofilm,BF)的空间结构的影响。方法采用摇床法,以纳米银离子含量不同的乙烯-醋酸乙烯酯(Ethylene-Vinyl acetate,EVA)塑料为细菌粘附载体,模拟体内铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,PA)BF形成的微环境,建立体外BF模型;将培养3 d的空白标本分别在扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)下及用FITC-ConA染色后荧光显微镜下观察不含纳米银EVA中BF的形成情况;将生长0.5、1、2、3、5 d的BF模型行SYTO9/PI染色,激光共聚焦扫描电镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)下摄取不同层面的图像,然后应用激光共聚焦显微镜TCS SP2自身具有的分析软件及ISA分析软件获得PAO1菌株BF的相关空间结构参数定量化数据。结果 (1)运用SEM及荧光显微镜的方法,在以不含纳米银EVA塑料为细菌粘附载体上培养3 d的标本中均观察到流线状的BF形成。(2)激光共聚焦显微镜TCS SP2自身具有的分析软件定量化分析显示,随着时间的延长,各含纳米银离子材料组PAO1菌株BF的平均厚度都呈先升高后降低的趋势,3天组都达最高值;纳米银离子的含量对BF厚度的影响差异无统计学意义(F=2.11,P0.1),作用时间对BF厚度的影响差异有统计学意义(F=985.81,P0.001)。(3)ISA软件定量化分析显示,银离子含量、作用时间对BF空间结构均有明显影响,不同时间组含有纳米银离子材料上BF的区域孔率(Areal Porosity,AP)、平均扩散距离(Average Diffusion Distance,ADD)及结构熵(Textural Entropy,TE)影响的均显著高于空白对照组(P0.05),但2种纳米银离子材料上BF的AP、ADD及TE的影响差异无统计学意义(P0.05)。随着培养时间的延长,各含纳米银离子材料组PAO1菌株BF的AP值、ADD值无明显的变化趋势,同一时间组的含有纳米银离子材料组PAO1菌株BF的AP值都高于空白对照组的AP值;同一时间组的含有纳米银离子材料组PAO1菌株BF的ADD值都低于空白对照组的ADD值。各含纳米银离子材料组PAO1菌株BF的TE值随着时间的延长,都呈先升高后降低的趋势,2天组都为最高值;同一时间组的TE值随着含纳米银离子的增加都呈降低趋势。结论运用摇床法成功建立了体外PAO1菌株BF模型;纳米银离子对PAO1菌株BF空间结构有显著的影响。
【作者单位】： 广东省中山市博爱医院新生儿科;重庆医科大学附属儿童医院新生儿科;
【关键词】： 细菌生物膜 模型 纳米银离子 定量分析
【基金】：中山市科技计划项目(20122A060)
【分类号】：R378.991
【正文快照】： 近20年来,细菌生物膜(Biofilm,BF)逐渐受到重视。BF是细菌在生长过程中,为适应生存环境而吸附于惰性或活性材料表面形成的一种与浮游细菌相对应的生长方式,由细菌和自身分泌的胞外基质(extracellular polymeric substances,EPS)组成[1]。研究发现,这类细菌群体与浮游菌在形态

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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【相似文献】

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本文编号：821075