多重PCR-变性高效液相色谱快速检测单核细胞增生李斯特菌毒力基因方法的建立

发布时间：2017-09-13 16:40

  本文关键词：多重PCR-变性高效液相色谱快速检测单核细胞增生李斯特菌毒力基因方法的建立

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【摘要】：目的建立单增李斯特菌的多个靶基因快速检测手段,提高检测的准确性。方法根据单增李斯特菌4个毒力基因(hly、prfA、inlA、inlB)设计引物,通过优化引物浓度和引物组合,进行多重PCR扩增,产物经变性高效液相色谱(DHPLC)进行快速检测。结果出峰顺序依次为inlB、hly、inlA、prfA,扩增片段大小为146、210、255、388 bp,此方法具有良好的特异性,灵敏度可达到280 cfu/ml。结论本方法可以满足实际工作中食品微生物检测的要求。
【作者单位】： 秦皇岛出入境检验检疫局;
【关键词】： 单增李斯特菌 毒力基因 变性高效液相色谱 多重聚合酶链式反应 食源性致病菌 食品安全
【分类号】：R346
【正文快照】： 单核细胞增生李斯特菌(L.moncytogenes,以下简称单增李斯特菌)是人畜共患病的致病菌,侵袭性胞内寄生,能穿越宿主的肠道、血脑和胎盘三道屏障[1],可导致胃肠炎、脑膜炎、败血症、流产等,病死率高达20%~30%[2]。单增李斯特菌在环境和生物体内分布广泛,其生存温度、pH范围较宽,在

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 杨大伟;刘云国;谭乐义;周裔斌;祝素珍;王建广;贾俊涛;姜英辉;;食品中A型肉毒梭菌PCR-DHPLC检测方法的建立[J];食品工业科技;2011年06期

2 于丰宇;李林;王红;王文斟;何源;刘晓朋;凌华;;应用PCR技术快速测定食品中单核细胞增生李斯特氏菌毒力[J];食品科学;2010年23期

3 曹际娟;闫平平;徐君怡;郑秋月;马惠蕊;谢明杰;;单核细胞增生李斯特氏菌PCR-DHPLC检测新技术的建立[J];生物技术通报;2008年S1期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 郑秋月;热加工食品和水产品中致病菌检测技术体系建立[D];沈阳农业大学;2009年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 何建华;徐冬e，

本文编号：844845