心肌组织特异性高表达核仁素转基因小鼠的构建与鉴定

发布时间：2017-09-14 03:23

  本文关键词：心肌组织特异性高表达核仁素转基因小鼠的构建与鉴定

  更多相关文章： 核仁素 转基因 心肌 小鼠

【摘要】：目的:构建并鉴定心肌组织特异性高表达核仁素(Ncl)的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响及其发挥心肌保护作用的机制提供动物模型。方法:采用基因重组法将小鼠核仁素基因的全长cDNA插入含心肌细胞特异性启动子的Alpha-MyHC clone 26载体,构建Alpha-MyHC clone 26-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;采用PCR鉴定阳性小鼠并用Western blotting法观察转基因小鼠中核仁素的表达情况,采用组织切片及HE染色法观察转基因小鼠心肌组织形态;测量心脏重量指数和左室压最大上升速率,观察核仁素在心肌组织高表达后对小鼠心脏形态功能是否有影响。结果:PCR法观察显示获得4只阳性小鼠(51、52、56和86,其中52和86系繁殖良好),Western blotting结果表明转基因小鼠的核仁素表达量明显高于野生鼠,HE染色等结果表明核仁素对心肌形态学、心脏/体重比值及心功能无明显影响。结论:成功制备了心肌组织特异性高表达核仁素的转基因小鼠,与野生型小鼠相比,转基因小鼠心肌形态及心功能无明显差异。
【作者单位】： 中南大学湘雅医学院病理生理教研室;
【关键词】： 核仁素 转基因 心肌 小鼠
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81170113)
【分类号】：R363
【正文快照】： 核仁素(nucleolin,Ncl)是目前发现的271种核仁蛋白质中含量最多的一种,约占核仁蛋白质总量 的10%⑴,是细胞内一个非常重要的具有多功能的务有限公司设计并合成核仁素PCR扩增引物,上游穿梭蛋白。研究表明,核仁素具有多种生物学功能,引物5’-AGTGAGGAAGATGCCAAAGC-3’,下游引物

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王慷慨,蒋磊,刘可,刘梅冬,王浩,易宇欣,袁灿,鄂顺梅,石永忠,肖献忠;热休克蛋白70对氧化应激所致核仁素裂解的影响[J];中国动脉硬化杂志;2004年04期

2 王慷慨,蒋磊,鄂顺梅,刘可,张玲莉,刘梅冬,肖献忠;核仁素表达下调对C_2C_(12) 细胞增殖与凋亡的影响[J];中南大学学报(医学版);2005年02期

3 蒋碧梅;;核仁素对大鼠心肌缺血预适应中HSP70表达的影响及其机制[J];中国病理生理杂志;2010年10期

4 宋娟;张任飞;张彬;蒋碧梅;;稳定表达核仁素的H9C2细胞株的建立和鉴定[J];长治医学院学报;2009年02期

5 杜忆华;;核仁素转录激活子功能研究[J];中国药师;2009年08期

6 周斌;蒋碧梅;;外源性核仁素转基因小鼠的构建与鉴定[J];中国动脉硬化杂志;2010年09期

7 宋娟;张任飞;张彬;邓红兵;蒋碧梅;;靶向核仁素RNA干扰载体的构建与筛选[J];长治医学院学报;2009年03期

8 张彬;肖献忠;张文辉;蒋磊;蒋碧梅;;核仁素对LPS诱导的白细胞介素1β释放的影响[J];中国病理生理杂志;2010年09期

9 方立;王慷慨;蒋磊;蒋碧梅;韦星;宋岚;邓恭华;肖献忠;;膜表面核仁素对脂多糖所致TNF-α和IL-1β表达的影响[J];中南大学学报(医学版);2008年11期

10 王慷慨,邓恭华,刘可,易宇欣,鄂顺梅,张玲莉,肖献忠;氧化应激所致C2C12肌源细胞核仁损伤的分子机制[J];中国动脉硬化杂志;2005年02期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 Tatsuji Haneji;Kaya Yoshida;Hirohiko Okamura;Lihong Qiu;;凋亡的成骨细胞中核仁素与核仁组织区相关蛋白的分裂[A];中华口腔医学会第七届全国口腔病理学术会议论文摘要汇编[C];2006年

2 蒋碧梅;张彬;邓红兵;宋娟;涂自智;邓恭华;肖献忠;;核仁素对大鼠缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡的影响及其机制研究[A];第七届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2009年

3 蒋碧梅;;核仁素对大鼠心肌缺血预适应中HSP70表达的影响及其机制[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 张彬;核仁素在大鼠缺血—再灌注损伤心肌中的表达及其抗心肌细胞凋亡作用研究[D];中南大学;2009年

2 王元忠;PNRC在核仁的定位、功能及其剪接变异体的分析[D];第三军医大学;2009年

3 刘变芳;肠出血性大肠杆菌（EHEC O157：H7）VT2毒素致病机理研究[D];西北农林科技大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 周斌;采用转基因小鼠初步探讨核仁素的心肌保护作用[D];中南大学;2011年

2 陈岸兰;核仁素在血管新生中的作用及其机制初步探讨[D];中南大学;2013年

3 吴莉雅;GW112 mRNA 3'端非翻译区特异性结合蛋白研究[D];重庆医科大学;2013年

，

本文编号：847584