结核多表位DNA疫苗免疫效果及其对小鼠耐药结核病的疗效观察

发布时间：2017-09-14 14:31

  本文关键词：结核多表位DNA疫苗免疫效果及其对小鼠耐药结核病的疗效观察

  更多相关文章： 结核分枝杆菌 表位 DNA疫苗 免疫 疗效 Hsp 异烟肼 利福平

【摘要】：目的研究比较结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗和卡介苗(BCG)的免疫效果,观察该疫苗联合抗结核药物治疗耐药结核病小鼠的疗效。方法随机将BALB/c小鼠分成A、B、C组,分别用PBS、BCG和多表位DNA疫苗经皮下免疫,1、3、5周各免疫1次。免疫后眼球采血,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测定特异性IgG抗体,用ELISA双抗体夹心法测定IL2和IFN-γ;同时分离小鼠脾细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖指数。为观察多表位疫苗的疗效,小鼠尾静脉注射结核分枝杆菌双耐菌株(耐利福平和耐异烟肼),4周后将感染模型小鼠随机分成D、E、F 3组,其中D组为阴性对照,注射生理盐水;E组用利福平、异烟肼治疗;F组为联合用药组,用结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗和利福平、异烟肼联合治疗,疗程均为10周。治疗结束后称取小鼠体重,取其肺、肝、脾,称取质量,并作肺和脾脏菌落计数。结果多表位DNA疫苗组小鼠血清特异性IgG抗体、IL2、IFN-γ和淋巴细胞增殖指数均明显高于PBS组和BCG组(P0.05);多表位DNA疫苗联合抗结核化疗药能明显降低耐药结核病小鼠肺、脾菌落计数和肺、肝和脾脏指数(P0.05)。结论结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗能在小鼠体内诱导较强的特异性免疫反应,产生高水平的特异性IgG抗体、诱导IL2和IFN-γ分泌和特异性淋巴细胞增殖,并能显著提高抗结核药物对耐药结核病小鼠的疗效。
【作者单位】： 延安大学医学院附属医院呼吸科;陕西省人民医院呼吸科;西安交通大学医学院第三附属医院;西安交通大学医学院;
【关键词】： 结核分枝杆菌 表位 DNA疫苗 免疫 疗效 Hsp 异烟肼 利福平
【基金】：陕西省自然科学基金资助项目(No.2006C228)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 结核病是最常见的传染病之一,也是传染病导致死亡的首要因素[1-2]。由于常规用于结核病预防的卡介苗(BCG)免疫的不确定性和不规范治疗引起耐药菌株的不断增多,其发病率和死亡率呈上升趋势。因此,对结核病的防治仍是目前研究的热点课题。关于结核DNA疫苗的免疫效果和治疗性疫苗

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 李守玮;李霞;;ITP患者血清IL-2、4、6、10及TNF-α、IFN-γ测定的临床意义分析[J];检验医学;2012年07期

2 杜蓬;李峰;董兆麟;陈超;;西安市耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因的突变型分析[J];西安交通大学学报(医学版);2012年01期

3 吴雪琼,张俊仙,李洪敏,史迎昌,张灵霞,梁建琴,金关甫,由昆;结核分支杆菌Ag85A DNA疫苗免疫治疗作用的研究[J];中国免疫学杂志;2002年01期

4 柏文娟;胡忠义;刘忠华;杨华;秦莲花;;结核患者血清IgG抗体适体的制备及特异性鉴定[J];中国人兽共患病学报;2011年12期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 梁艳;吴雪琼;张俊仙;阳幼荣;王兰;李洪敏;李忠明;史迎昌;陆阳;;结核分支杆菌Ag85A质粒DNA疫苗和抗结核药物联合治疗小鼠耐药结核病[J];广东医学;2007年09期

2 白广红;焦向阳;袁志敏;古翠姣;李静;;SELEX适配子抗体检测在结核病早期诊断中的应用研究[J];国际检验医学杂志;2012年23期

3 李卓林;王璐璐;刘日辉;陈燕芬;陈泽良;于雅琴;;吉林省110株结核分枝杆菌临床分离株MLVA基因分型[J];吉林大学学报(医学版);2013年02期

4 杜朝阳;李虎;张薇薇;叶辛;谷明莉;徐玉莲;邓安梅;钱宝华;;特发性血小板减少症患者外周血单个核细胞穿孔素表达水平研究[J];国际检验医学杂志;2013年14期

5 李敏思;伏小平;宋战昀;付志金;;核酸适配体在病毒检测中的研究进展[J];动物医学进展;2013年07期

6 Bin Zhang;Wen-hui Lun;Xing-wang Li;Qi Wang;Jun Cheng;Yu Mao;;Specific T-cell Responses to CFP10,an Secreted Antigens of Mycobacterium Tuberculosis Protein,in Chinese HIV Positive Individuals[J];Infection International(Electronic Edition);2013年01期

7 李Oz;陆兰英;张宗琪;;Ag85A蛋白特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值[J];武汉大学学报(医学版);2012年04期

8 张帆,赵晔,钟森,史小玲,陈枫,张建军;结核分枝杆菌Ag85A真核表达质粒的构建与鉴定[J];泸州医学院学报;2003年03期

9 石庆凤,钟森,邓存良,史小玲,王明勇;结核分支杆菌Ag85A/hsp70嵌合DNA疫苗的免疫效应研究[J];泸州医学院学报;2005年03期

10 陈艳清;张林波;;结核分枝杆菌免疫逃逸分子机制的研究进展[J];免疫学杂志;2014年01期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 梁艳;吴雪琼;李忠明;李宁;张俊仙;阳幼荣;白雪娟;余琦;侯英;刘翠华;安慧茹;史迎昌;刘银萍;王博;王兰;刘成龙;;Ag85A/B嵌合DNA疫苗治疗小鼠敏感结核病疗效的实验研究[A];2010年中国防痨协会临床/基础专业学术大会汇编[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前9条

1 陆宇;结核分枝杆菌mRNA定量检测作为活菌标志及其用于利福平药物敏感性分析、化疗反应监测的研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2003年

2 梁艳;结核分枝杆菌DNA疫苗单独或联合治疗小鼠结核病模型的研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2008年

3 解国品;疏风凉血补肾法干预下CITP患者PD-1/PD-L变化规律的研究[D];广州中医药大学;2013年

4 叶志坚;T细胞亚群在淋巴细胞性胸腔积液中的免疫学特征[D];华中科技大学;2013年

5 路蝉伊;结核不同感染状态下宿主对结核特异性抗原获得性免疫应答的差异及相关分子标识筛选[D];复旦大学;2011年

6 董丹丹;海分枝杆菌细胞壁毒力成分分离鉴定及功能研究[D];复旦大学;2011年

7 杨会峰;维生素D在结核杆菌感染条件下对小鼠获得性免疫表型和功能的影响及机制研究[D];第三军医大学;2013年

8 张茜;Galectin-9介导的活化CD4~+ T细胞免疫平衡改变减轻小鼠抗GBM肾炎[D];华中科技大学;2013年

9 李青;结核病多期抗原亚单位疫苗的构建评价及IL-17的结核免疫作用[D];甘肃农业大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 邹绮;采用SELEX技术筛选玉米赤霉烯酮单克隆抗体DNA适配子的初步研究[D];上海交通大学;2013年

2 高诗会;结核分枝杆菌新核酸标识的ISSR分型筛选及在鉴别检测中的初步应用[D];苏州大学;2013年

3 乔雪;Th17细胞在免疫性血小板减少症中的表达及致病机制研究[D];河北医科大学;2013年

4 陈艳清;结核分枝杆菌侵染对巨噬细胞部分基因表达的影响[D];吉林农业大学;2013年

5 邱月琴;结核病人中研究Tim-3调节T细胞的免疫应答作用及细胞因子之间的关系[D];暨南大学;2013年

6 宋英健;深圳市汉族人群TGFβ1基因多态性与结核病的相关性研究[D];暨南大学;2013年

7 庹清章;结核杆菌Hsp16.3对感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响及其机制研究[D];石河子大学;2013年

8 周乐亮;T-SPOT.TB联合细胞因子INF-γ、IL-10等检测在结核病诊断中的应用[D];中南大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 王桥霞;滕林;曲延文;;结核杆菌特异性抗原对结核病诊断价值研究[J];中国热带医学;2009年11期

2 刘艳;杨忠华;姜路明;;结核分枝杆菌蛋白抗原的研究进展[J];现代生物医学进展;2010年24期

3 张慧卿;方念;张q和;;适配子筛选技术[J];中国生物工程杂志;2008年01期

4 全国结核病流行病学抽样调查技术指导组;2000年全国结核病流行病学抽样调查报告[J];中国防痨杂志;2002年02期

5 刘忠华;丁元生;毕爱笑;冯永红;金瑞良;杨华;秦莲花;胡忠义;;结核分枝杆菌38kD-16kD融合蛋白克隆表达及血清学诊断价值[J];中国防痨杂志;2009年10期

6 范超明;李伟;樊德利;郑小银;丁建祖;;结核杆菌重组基因16kD-38kD融合蛋白诊断结核病的应用价值[J];中国卫生检验杂志;2010年10期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 朱中元;王海波;谢勇;陈英兰;郑冰冰;张春发;张颖;;表达结核分枝杆菌融合蛋白的DNA疫苗构建及免疫保护[J];免疫学杂志;2006年01期

2 吴雪琼;郑越;徐燕杰;张俊仙;陆阳;张灵霞;史迎昌;李洪敏;韩永;曹立雪;李忠明;;不同剂量结核病DNA疫苗及细胞因子联合免疫的研究[J];中国免疫学杂志;2006年10期

3 李君武;黄泽棋;姚翠婵;周曙光;李晓栋;宋东;黄清华;;结核分枝杆菌融合基因Hsp65-Esat6荧光表达载体的构建及表达(英文)[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年29期

4 王庆敏;孙树汉;康林;;遍在蛋白质-结核MPT64融合基因DNA疫苗的构建及免疫效应[J];第二军医大学学报;2008年02期

5 朱中元,刘建兵,王海波,谢勇,张春发,张颖;结核分枝杆菌Mtb8.4DNA疫苗构建及免疫保护研究[J];中国热带医学;2005年08期

6 胡佳杰,文学明,肖爱清,黄海浪;人结核分枝杆菌hsp70DNA疫苗有关毒性实验研究[J];数理医药学杂志;2002年05期

7 王宝林,王洪海;结核分枝杆菌DNA疫苗研究进展[J];中华结核和呼吸杂志;2004年11期

8 李文桂,陈雅棠;结核分枝杆菌Ag85 DNA疫苗研究进展[J];中国人兽共患病杂志;2005年08期

9 袁伟;董娜;张丽芳;林树柱;向志光;乔红伟;秦川;;小鼠对结核分枝杆菌Ag85B-Esat6-HspX融合基因的免疫反应[J];中国比较医学杂志;2011年06期

10 史霖;刘珊;程雁斌;范桂香;袁育康;艾立;;弓形虫多表位DNA疫苗的构建及其免疫保护作用[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年07期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 李向群;刘君炎;;治疗性结核分枝杆菌HSP65自杀性DNA疫苗的构建[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年

2 史小玲;李晖;钟森;张建军;邓存良;黄永茂;卢润生;吴建林;卫帮富;蒋绍双;;Hsp70/CD80嵌合DNA疫苗对结核杆菌的治疗作用[A];中国防痨杂志2003第25卷增刊——2003年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2003年

3 张月新;辛毅;马郁芳;;结核分枝杆菌RmlB的表达、纯化及酶促反应动力学研究[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年

4 刘焰;刘胜武;谈蓉;马立新;刘君炎;;结核分枝杆菌Ag85B与ESAT-6双顺反子重组腺表达载体的构建[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

5 陈曦;张宗德;刘忠泉;贾红彦;邢爱英;古书香;;结核分枝杆菌rv3873、rv3879c基因原核表达载体的构建和表达[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会议论文汇编[C];2006年

6 周培富;谢建平;;结核分枝杆菌双组份调控系统概况[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年

7 赵全菊;谢建平;;结核分枝杆菌蛋白酶毒力因子的分子遗传研究[A];遗传学与社会可持续发展——2010中国青年遗传学家论坛论文摘要汇编[C];2010年

8 冯永红;杨鑫;丁元生;秦莲花;杨华;郑瑞娟;王洁;胡忠义;;结核分枝杆菌CE抗原复合物对人巨噬细胞TNF-α产生及抗原提呈相关功能分子表达的影响[A];全国复治肺结核诊断与治疗进展研讨会论文汇编[C];2007年

9 朱明利;;分枝杆菌L型及其检测方法研究进展[A];2007年浙江省医学病毒学、医学微生物与免疫学学术年会论文汇编[C];2007年

10 吴园;胡频频;王易伟;李秀全;毛旭虎;钟敏;;结核分枝杆菌Rv0341蛋白编码基因iniB的多态性分析[A];2010年中国防痨协会临床/基础专业学术大会汇编[C];2010年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 张中桥;胃癌免疫治疗研究有新进展[N];中国医药报;2002年

2 ;DNA疫苗“饿”杀小鼠肿瘤[N];医药经济报;2003年

3 庄愉;新型抗结核疫苗的开发研究[N];中国医药报;2002年

4 记者 陈青;让结核菌三天内原形毕露[N];文汇报;2009年

5 束洪福;丙肝疫苗研究有新进展[N];科技日报;2008年

6 基因潮;美国默克公司进行预防HIV的临床试验[N];中国高新技术产业导报;2002年

7 李天书;刘云涛;新生病毒敲响警钟[N];中国医药报;2004年

8 ;映日荷花别样红[N];中国医药报;2004年

9 娄彦艳 魏于全;肿瘤基因与分子疫苗面面观[N];医药经济报;2001年

10 江沂;“抗非”征程又现光芒[N];医药经济报;2003年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 李光富;日本血吸虫复合表位及其在CpG ODN协同下诱导的Th1应答对小鼠的免疫保护作用[D];南京医科大学;2004年

2 高军;丙型肝炎病毒多表位抗原的基因合成与免疫原性研究[D];第二军医大学;2004年

3 林治华;QSAR分析结合实验方法用于T细胞表位快速筛选的研究[D];第三军医大学;2003年

4 李长岭;PfCP-2.9疟疾疫苗候选抗原系列突变体的构建及其表位和免疫学分析[D];第二军医大学;2010年

5 邵文爱;单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白加趋化因子MIP-1α核酸疫苗的构建及初步免疫观察[D];天津医科大学;2004年

6 殷瑛;以乙型肝炎病毒核心蛋白为载体的新型疫苗研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年

7 王涛;嗜肺军团菌mip基因DNA疫苗初步研究[D];四川大学;2004年

8 陈安;一个新的HBcAg之H-2K～d限制性表位的鉴定及其功能特性研究[D];第三军医大学;2004年

9 时阳;MAGE-1与IL-18共表达DNA疫苗的构建及体内外功能验证[D];吉林大学;2004年

10 张梦寒;汉城病毒M片段和汉滩病毒部分S片段核酸疫苗pEGFP-M-S的构建及基因免疫研究[D];苏州大学;2005年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张丽婷;结核分枝杆菌分泌蛋白64抗原模拟表位的筛选研究[D];山西医科大学;2010年

2 黄力;口蹄疫多表位DNA疫苗的免疫原性[D];河北医科大学;2004年

3 黄泽棋;结核分枝杆菌Esat6与人集落刺激因子融合质粒的构建及表达[D];暨南大学;2007年

4 蒋青桃;结核杆菌ESAT-6抗原Th1型表位与FL重组DNA疫苗免疫效果及其保护作用的研究[D];南京医科大学;2011年

5 赵r嚺，

本文编号：850579