抗尖吻蝮蛇蛇毒金属酶类共同基序IgY抗体的制备与研究

发布时间：2017-09-15 10:12

  本文关键词：抗尖吻蝮蛇蛇毒金属酶类共同基序IgY抗体的制备与研究

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【摘要】：[目的]制备针对尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶类共同基序的Ig Y抗体,并对其中和蛇毒活性的作用进行研究。[方法]通过分析尖吻蝮蛇蛇毒各类金属蛋白酶类共有序列,设计合成与其酶活性密切相关且高度保守的抗原肽PT1和PT2;偶联复合物KLH-PT1、KLH-PT2免疫母鸡获得Ig Y抗体。采用ELISA和Western blot等方法对Ig Y效价及与尖吻蝮蛇蛇毒和短尾蝮蛇蛇毒的交叉反应特性进行初步研究;最后通过抗小鼠皮下出血实验对Ig Y中和活性进行评价。[结果]ELISA、Western blot结果表明,抗KLH-PT1、抗尖吻蝮蛇蛇毒Ig Y均可与尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒发生交叉反应且后者显著强于前者;抗KLH-PT2 Ig Y在体外与尖吻蝮蛇蛇毒、短尾蝮蛇蛇毒无明显交叉反应,在体内抗出血实验中却表现出很强的中和毒性作用,并且显著优于前两者。[结论]通过设计金属蛋白酶共有序列抗原肽,制备了能与多种血循型蛇毒交叉反应的Ig Y抗体,这为制备特异、高效、低毒性且广谱的抗出血型蛇毒抗体奠定了基础。
【作者单位】： 浙江中医药大学生命科学学院;
【关键词】： 金属蛋白酶 抗原肽 尖吻蝮蛇蛇毒 免疫 Ig Y 出血型蛇毒
【基金】：浙江省教育厅科研项目(Y201224592) 浙江省大学生科技创新活动计划项目(2013R410028) 浙江省重点科技创新团队项目(2011R09042-04,2009R50042)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： JOURNALOFZHEJIANGCHINESEMEDICALUNIVERSITYVOL.38NO.12Dec.2014论著尖吻蝮蛇(Deinagkistrodon acutus)是我国常见的毒蛇,其毒液主要为血循毒[1-2],其中蛇毒金属蛋白酶[3]是引起出血的主要物质,它们有的干扰伤口血液的凝结和血栓的形成,有的则降解胞外基质或基底膜,是蛇毒蛋

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本文编号：855909