猪链球菌2型中国强毒株05ZYH33 ofs基因敲除突变株构建及其生物学特性研究

发布时间：2017-09-15 11:28

  本文关键词：猪链球菌2型中国强毒株05ZYH33 ofs基因敲除突变株构建及其生物学特性研究

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【摘要】：目的探究猪链球菌血清浑浊因子ofs基因在强致病性2型猪链球菌致病过程中的作用。方法利用同源重组基因敲除方法构建中间为壮观霉素抗性基因,两侧为ofs编码基因上、下游同源序列的基因敲除质粒,将构建好的质粒电转化入猪链球菌感受态,同源重组筛选ofs基因敲除突变株,通过组合PCR、Southern杂交和DNA测序对疑似突变株进行验证。生物学功能实验研究比较ofs突变株和野生株05ZYH33在革兰氏染色、菌落溶血活性、生长速率和毒力等方面的差异。结果组合PCR、Southern杂交和DNA测序结果均证实ofs基因敲除突变株05ZYH33Δofs构建成功,体外实验结果显示ofs基因缺失后菌株在革兰氏染色和菌落溶血活性及形态、生长速率等方面未发生改变,但小鼠毒力实验数据结果表明敲除突变株Δofs的毒力降低。结论猪链球菌2型ofs基因与细菌的毒力相关,本实验构建的突变株05ZYH33Δofs为进一步研究猪链球菌2型的致病机理奠定基础。
【作者单位】： 温州医学院检验医学院生命科学学院;南京军区军事医学研究所;
【关键词】： 猪链球菌型 ofs 基因敲除 生物特性 毒力
【基金】：国家自然科学基金(No.81172794;No.81071317;No.31170124;No.81171527) 江苏省自然科学基金资助项目(No.BK2011098;No.BK2011097) 南京军区医学科技创新课题(ZX39)资助~~
【分类号】：R378.1
【正文快照】： 猪链球菌2型(Streptococcus suis 2,S.suis 2)是一种危害全球的人兽共患病病原菌。该病原菌不仅可致猪脑膜炎、败血症、关节炎、肺炎及心内膜炎等,而且还可感染人,给相关从业者和广大群众的生命安全造成严重威胁[1-2]。但目前S.suis 2致病的具体机制仍不清楚。对于猪链球菌毒

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本文编号：856255