成年大鼠心肌细胞分离培养及兴奋-收缩耦联表征

发布时间：2017-09-15 18:44

  本文关键词：成年大鼠心肌细胞分离培养及兴奋-收缩耦联表征

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【摘要】：目的比较两种细胞分离液分离成年大鼠心肌细胞,进一步表征成年大鼠心室肌细胞兴奋-收缩耦联。方法 Langendorff装置进行主动脉逆流灌流,分别用两种细胞分离液分离成年大鼠心肌细胞,无血清培养并进行腺病毒感染。显微镜下观察单个心肌细胞的形态学特点,荧光显微镜下检测病毒感染。采用IonOptix仪器检测心肌细胞肌节收缩-舒张指标以及心肌细胞钙离子摄入-排出指标。结果两种分离液均可获得70%横纹清晰的长杆状心肌细胞,培养可存活7 d以上。腺病毒感染48 h,绿色荧光蛋白持续表达7 d以上。分离液一获得的心肌细胞不能很好地随电场刺激产生收缩,分离液二获得的细胞可用于检测兴奋-收缩耦联特性,心肌细胞肌节缩短分数为11.61%±2.15%,舒张时间为(0.177±0.031)s,钙瞬变幅度为30.79%±9.74%,钙瞬变衰减时间为(0.300±0.074)s。结论两种分离液均可用于分离和培养成年大鼠心肌细胞,并用于腺病毒转染等长时程研究。分离液二更适用于检测成年大鼠心肌细胞的兴奋-收缩耦联特性。
【作者单位】： 北京大学第三医院心内科血管医学研究所 卫生部心血管分子生物学与调节肽重点实验室 分子心血管学教育部重点实验室 心血管受体研究北京市重点实验室;
【关键词】： 心肌细胞 成年大鼠 分离 培养 兴奋-收缩耦联
【基金】：国家自然科学基金(81100164、81070078、81270157) 高等学校博士学科点专向科研基金(20100001110101、20110001120015)
【分类号】：R329
【正文快照】： 目前,心肌细胞是心脏疾病研究主要应用的细胞模型,乳鼠心肌细胞分离和培养的技术方法非常成熟并被广泛接受。但是乳鼠心肌细胞与成体心肌细胞相比,其结构和功能都存在极大的差异,尤其是利用乳鼠心肌细胞培养来研究心肌细胞电生理存在着很大的局限性,因此人们开始探索成体心肌

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本文编号：858274