比格犬ERβ剪切异构体ERβ419沉默表达载体的构建及筛选

发布时间：2017-09-21 01:22

  本文关键词：比格犬ERβ剪切异构体ERβ419沉默表达载体的构建及筛选

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【摘要】：目的构建最有效的慢病毒介导RNAi干扰序列,未来将应用于比格犬ERβ419的未知生物学功能的探索。方法模拟比格犬ERβ419靶细胞筛选针对目的基因mRNA设计的最佳干扰序列实验,通过qRT-PCR和Western Blot技术筛选最佳沉默表达载体序列。结果qRT-PCR结果显示,ERβ419-shRNA1(P0.01)和ERβ419-shRNA3(P0.01)的差异表达极显著,Western Blot结果与qRT-PCR结果一致,ERβ419-shRNA3的干扰效果最佳。结论 ERβ419-shRNA3最有效地抑制了目的基因的表达,未来将应用于探索比格犬ERβ419未知生物学功能对比格犬生殖系统影响的研究,并进而预防和治疗比格犬繁殖机能障碍性疾病。
【作者单位】： 黑龙江八一农垦大学动物科技学院;实验动物中心;五棵树经济开发区动物卫生监督所;
【关键词】： 比格犬ERβ 稳定表达细胞系 基因沉默
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31372271)
【分类号】：R-332
【正文快照】： 。比格犬ERβ419为该犬最新发现的ERβ剪切异构体,尚无其生物学功能的报道。ERβ419 c DNA序列由下丘脑-垂体-性腺轴提纯得到,ERβ419由1257个碱基组成,编码419aa,命名为ERβ419。研究未知基因的生物学功能通常借助于慢病毒介导RNAi重组载体,本实验旨在筛选最有效的沉默表达载

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本文编号：891557