人骨髓来源间充质干细胞分泌外泌体特性研究

发布时间：2017-09-22 12:03

  本文关键词：人骨髓来源间充质干细胞分泌外泌体特性研究

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【摘要】：本研究旨在探讨正常人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)分泌的外泌体(exosome)免疫调节功能及支持血管形成能力。收集第4-6代BMMSC上清液提取外泌体,应用透射电镜观察其形态,蛋白印迹法检测其表面特异标志CD9,bicinchoninic acid(BCA)方法定量检测外泌体分泌量;与正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNC)作用72 h后用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测PBMNC分泌的γ-干扰素(IFN-γ);实时定量PCR检测外泌体内免疫相关microRNA表达;共聚焦显微镜观察外泌体与人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的作用方式,与HUVEC共培养后观察其网状结构形成;应用裸鼠体内试验检测外泌体对血管形成能力的作用。结果表明,正常人骨髓间充质干细胞分泌的外泌体近似圆形,直径在40-160 nm之间,表达表面标志CD9,其分泌量与接种细胞数呈线性关系,可抑制PBMNC分泌IFN-γ(P0.01),内含有免疫相关microRNA如miR301、miR22和miR-let-7a等,能促进HUVEC网状结构形成和血管形成(P0.01)。结论:BMMSC分泌外泌体具有免疫调节功能与支持血管形成作用。
【作者单位】： 中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院、血液学研究所 实验血液学国家重点实验室;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 外泌体 免疫调节 血管形成
【基金】：国家自然科学基金重点项目(81330015) 国家重点基础研究发展计划"973计划"(2011CB964800)
【分类号】：R329.25
【正文快照】： 外泌体(exosome)为微小囊泡,直径大约20-140 nm,在生理或病理情况下,由多种细胞内膜(en-dosomal membrane)以出芽方式形成的多泡体,参与细胞间的信息交流,并参与到多种生理病理过程中[1]。来源于不同的组织的外泌体不仅具有其特异性蛋白分子,而且还包含其行使功能的关键分子[2

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本文编号：900698