大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选

发布时间：2017-09-25 15:43

  本文关键词：大容量人源Fab噬菌体展示抗体库的构建及抗CD276抗体筛选

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【摘要】：目的构建大容量人源Fab噬菌体库,筛选并鉴定抗CD276的特异性抗体。方法通过采集10位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA,利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,插入噬菌体载体pCANTAB5H中,构建人源Fab噬菌体抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,随机挑取96个单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选出与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为5×1010的噬菌体抗体库,从中筛选到11株阳性克隆,对其进行测序鉴定,表明该11株克隆的序列均一致,ELISA证实其对抗原CD276具有较强的结合性。结论构建了大容量人源Fab抗体库,从中获得具有抗CD276的人源Fab抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。
【作者单位】： 中国科学院深圳先进技术研究院抗体药物研究中心;吉林大学生命科学学院;
【关键词】： 免疫球蛋白Fab片段 噬菌体展示抗体库 CD
【基金】：诺和诺德-中科院专项研究经费(NNCAS-2013-9)
【分类号】：R392
【正文快照】： CD276,又叫B7-H3,是2001年在人树突状细胞cDNA文库中鉴定出的B7超家族共信号分子[1]。近年来的研究表明共信号分子不仅能提供T细胞活化所需的共信号分子促进T细胞免疫应答[2],在抗炎和抗肿瘤免疫应答中发挥关键作用,同时也可以提供下调免疫应答的负性共信号分子,维持T细胞免疫

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1 王琰;抗体库技术[J];细胞与分子免疫学杂志;1993年03期

2 杜威世;孙志伟;俞炜源;;噬菌体抗体库研究进展[J];生物技术通讯;2006年02期

3 张春莉;抗体库技术[J];微生物学免疫学进展;2001年04期

4 勾蓝图;杨金亮;;抗体库技术与策略进展[J];生物技术通讯;2009年06期

5 高学良,钱e，

本文编号：918205