高效价抗肠道病毒71型兔血清的制备及鉴定

发布时间：2017-09-28 15:10

  本文关键词：高效价抗肠道病毒71型兔血清的制备及鉴定

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【摘要】：目的制备高效价的抗肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)兔血清。方法分别用RD细胞和Vero细胞培养EV71,纯化后,将经甲醛灭活和未灭活的EV71抗原分别加入佐剂或不加佐剂,经不同途径(肌肉、皮下、腹腔)免疫家兔,每周采血,分离血清,分别采用ELISA、免疫双扩散、免疫荧光和中和抗体试验检测兔血清抗体效价,并分析不同方法检测兔血清抗体结果的相关性。结果未灭活和灭活的纯化EV71抗原加弗氏佐剂后,经皮下或肌肉途径免疫家兔均可获得高效价的抗EV71兔血清,其中加弗氏佐剂的灭活疫苗经皮下途径免疫获得了最高滴度的中和抗体;当抗血清ELISA效价达到或接近1∶108,免疫双扩散效价达到或接近1∶512,抗血清1∶2 000稀释后荧光强度荻时,可进行免疫家兔的全血采集;不同方法免疫家兔全血采集的血清中和抗体效价为29 406~1 280 652 U/0.2 ml;免疫双扩散检测与中和抗体和免疫荧光检测结果的相关性较高。结论获得了高效价的抗EV71兔血清,为EV71疫苗抗原的相关检定创造了条件。
【作者单位】： 武汉生物制品研究所有限责任公司;
【关键词】： 肠道病毒 家兔 抗血清 酶联免疫吸附测定 免疫双扩散 中和抗体
【分类号】：R392
【正文快照】： 近几年,手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)的发病情况在我国日趋严重,其中由肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)引发的HFMD对患儿造成的危害更大[1-2]。针对近些年HFMD的流行状况,目前国内有几家单位研制的EV71疫苗已完成III期临床试验[3-4]。随着EV71疫苗临近上市,需

【参考文献】

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本文编号：936529