高灵敏焦测序结合生物发光分析仪检测甲型H1N1流感病毒

发布时间：2017-10-02 13:25

  本文关键词：高灵敏焦测序结合生物发光分析仪检测甲型H1N1流感病毒

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【摘要】：目的:建立基于核酸序列分析的快速、准确、低成本的甲型H1N1流感病毒检测方法。方法:通过优化焦测序反应体系中ATP硫酸化酶和荧光素酶的浓度,建立高灵敏的焦测序反应体系;将该体系应用于低成本、小型化的便携式生物发光分析仪,焦测序分析流感病毒M、NP、HA基因片段的核酸序列。结果:优化后的焦测序反应体系可检测低至10 fmol的DNA样本,检测灵敏度较传统焦测序提高了10倍以上。对两例样本进行检测,根据所测得的M、NP、HA基因特异性片段序列,可以确认其均为甲型H1N1感染;另外,对M2蛋白阻断剂耐药性标志位点(S31N突变)的测定结果显示该病毒存在S31N突变,为M2蛋白阻断剂耐药型。结论:高灵敏焦测序体系结合便携式生物发光分析仪成功实现了对甲型H1N1流感病毒快速、准确的低成本检测。
【作者单位】： 华东医学生物技术研究所;南京大学医学院附属金陵医院药理科;
【关键词】： 高灵敏焦测序 甲型HN流感病毒 耐药性突变 便携式生物发光分析仪
【基金】：国家自然科学基金项目(31300706) 江苏省科技支撑计划-社会发展项目(BE2011607) 第54批中国博士后科学基金面上资助项目(2013M542575)
【分类号】：R373
【正文快照】： 个基因,分别编码八种结构蛋白(PB2B1前言、P、PA、HA、NP、NA、M1、M2)及两种非结构蛋白(NS1、NS2)[3,4]。根据HA与NA的人类与流感的抗争贯穿整个人类的历史,每一次流感的大不同亚型组合,甲型流感病毒可分为各种血清型,而众多的血流行都给人类带来恐惧和挑战,但同时也推动着人

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本文编号：959869