肺微血管内皮细胞原代培养方法的建立

发布时间：2017-10-03 06:19

  本文关键词：肺微血管内皮细胞原代培养方法的建立

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【摘要】：目的建立大鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法,观察细胞生长状态并鉴定细胞性质。方法 4~5周龄大鼠随机分成3组,无菌状态下剥除胸膜,将肺组织边缘剪成1 mm3的大小,贴入一次性培养瓶,分别用含肝素钠的DMEM完全培养液、RPMI1640完全培养液以及含原代内皮细胞培养特制添加剂的完全培养液培养,在倒置显微镜下观察细胞生长和形态,免疫荧光组织化学染色观察细胞CD31的表达。结果与2组对照组相比,采用含原代内皮细胞培养特制添加剂的完全培养液培养,获得的肺微血管内皮细胞数量多,纯度高。内皮细胞于24 h迁移出肺组织块,14 d左右汇合,呈多角形,以铺路石样镶嵌状排列生长。传代细胞呈长梭形,生长迅速,具有自发形成血管的倾向。细胞为CD31免疫反应阳性,证实其为内皮细胞。结论采用组织块贴壁法,选择原代内皮细胞培养特制添加剂以及优化分离过程,可以获得高纯度原代大鼠肺微血管内皮细胞。
【作者单位】： 长治医学院病理生理学教研室;长治医学院机能综合实验室;长治医学院肝病研究所;长治医学院人体寄生虫学教研室;长治医学院药理教研室;
【关键词】： 肺微血管内皮细胞 原代培养 大鼠
【基金】：国家自然科学基金(81070339) 山西省高等学校科技创新项目(2010120) 山西省国际科技合作项目(2010081068) 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室主任基金(2010-09) 山西省回国留学人员资助项目(211-091)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 肺微血管内皮细胞覆盖在肺微血管腔表面,不仅是血管内外物质交换的重要屏障,而且是循环中危险因素作用的重要靶标。许多致病因素如炎症、缺氧、氧化应激、内毒素等都可以刺激内皮细胞分泌细胞因子,后者在血管相关性疾病中发挥重要作用[1]。由于不同器官的内皮细胞特性不同[2-3

【参考文献】

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1 李颖川;江伟;周明;薛瑛;李亚春;;大鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法的改进及细胞鉴定[J];上海交通大学学报(医学版);2010年11期

2 时全星;孙新;李娟;郭海涛;殷s，

本文编号：963610