龙柴方对DHBV感染麻鸭模型HBV抑制作用的研究

发布时间：2017-10-04 18:48

  本文关键词：龙柴方对DHBV感染麻鸭模型HBV抑制作用的研究

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【摘要】：本研究从理论文献角度对CHB中西医研究现状角度进行了概括、总结和分析,并通过实验研究建立DHBV感染麻鸭模型,观察龙柴方对动物模型血清HBV载量及病毒复制的影响变化,探讨其抗DHBV病毒的抑制作用,为临床疗效提供科学依据。第一部分：理论研究 从现代医学对HBV生物特性,CHB的病原学、流行病学、诊断治疗、药物评价等研究概况,龙柴方对CHB疗效作用的理论机制方而进行了探讨。研究归纳认为,现代医学对HBV感染传播途径及机制清楚,核苷类似物(NAs)及干扰素(IFN)抗HBV客观有效,但持久耐药、毒副作用及停药后反弹甚至加重等成为人们关注的医学问题。中医药认为CHB的发病与湿、热、郁、瘀、毒等病理因素相关,主要采用辨证分型论治、经验效方、中西医结合等方法治疗,取得了可喜的成绩。龙柴方对CHB客观有效,具有一定的抗HBV作用,其疗效作用是建立在中医传统功效理论基础之上,并与其组方药物的中药药理机制相关。第二部分：建立HBV感染麻鸭模型,通过龙柴方高、中、低不同给药剂量干预10天,与阳性药物拉米夫定(3TC)和病毒空白组照,观察龙柴方对HBV感染鸭血清中DHBV DNA的抑制作用。结果表明,①各药物干预与病毒对照组比较在第D0、D10天DHBV DNA表达呈明显下降(P0.01)；②拉米夫定前期对DHBV DNA的抑制作用优于龙柴方各组(P0.05和0.01),但停药后出现明显抑制下降,DHBV反跳,而龙柴方各组呈现持续的抑制作用；③龙柴方高、中、低剂量组间比较,以低剂量组抑制效果最佳,抑制作用持续；④龙柴方高、中、低剂量各组对DHBV的抑制作用未呈现明显的量效关系。分析认为,龙柴方对DHBV具有抑制作用,虽短期内其抗HBV效应较拉米夫定为低,但龙柴方显示出持久的抗HBV作用：至于中、高剂量未显示出优于低剂量组的抗HBV活性作用,考虑可能与组方药物中大剂量的龙葵、白花舌蛇草等的细胞毒作用相关,以致细胞免疫功能低下,HBV增殖活跃。本研究提示,临床治疗CHB,在使用NAs和IFN的同时,配合使用常规剂量的龙柴方将可能提高抗HBV效应,实现持久的免疫应答,提高疗效；同时避免使用大剂量方剂。本研究为龙柴方具有的抗HBV作用提供实验依据,亦为中医效方对CHB的疗效作用提供科学证据。
【关键词】：HBV DHBV感染模型 龙柴方 清热解毒 调和脾胃 DHBV DNA 抗HBV作用
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 前言11-12
• 第一部分 理论研究12-21
• 1. 现代医学对CHB的相关理论概述12-14
• 1.1 HBV致病的生物学特性及新概念12
• 1.2 CHB流行病学的新数据12-13
• 1.3 CHB诊治现状简述13
• 1.4 对抗HBV药物的评价13-14
• 2. 中医学对CHB的相关研究概括14-17
• 2.1. 中医对CHB相类病症认识14-15
• 2.2. 中医对CHB的病因病机认识15-16
• 2.3. 治则框架结构的现状16
• 2.4. 部分名医学术思想及经验摘要16-17
• 3. 龙柴方对CHB疗效作用的理论分析17-21
• 3.1. 龙柴方方证相应理论的建构17-18
• 3.2. 龙柴方组方药物解释18
• 3.3. 龙柴方组方药物的药理作用概述18-19
• 3.4. 龙柴方相关研究撷要19-21
• 第二部分 实验研究21-30
• 一、实验目的21
• 二、实验材料21-23
• 1. 实验动物21
• 2. 病毒株21
• 3. 受试药物21
• 4. 实验药物供试液配制21-22
• 5. 实验试剂22
• 6. 一般试剂配制22
• 7. DIG标记试剂盒配制22-23
• 8. 仪器及耗材23
• 三、实验方法23-24
• 1. DHBV探针的制备23
• 2. DHBV的地高辛标记23
• 3. 标记探针的浓度鉴定23
• 4. 鸭乙型肝炎的病毒感染23
• 5. 动物分组与药物干预23-24
• 6. 血清DHBV DNA定量检测(斑点杂交法)24
• 7. 病毒抑制率计算24
• 8. 统计学与数据处理方法24
• 四、实验结果24-28
• 1. 各组鸭血清中DHBV DNA表达情况25
• 2. 各组鸭血清中DHBV DNA斑点灰度值比较25-27
• 3. 龙柴方对血清中DHBV DNA复制的抑制率变化比较27-28
• 五、讨论28-30
• 1. DHBV感染动物模型的建立28
• 2. 龙柴方对DHBV DNA表达抑制作用分析28
• 3. 龙柴方对DHBV DNA复制的抑制率讨论28-29
• 4. 龙柴方对DHBV DNA抑制作用的量效关系分析29-30
• 结语30-31
• 参考文献31-35
• 附录一 英文缩略词表35-37
• 附录二 综述37-41
• 参考文献40-41
• 附录三 攻读硕士学位期间取得的学术成果41-42
• 致谢42

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本文编号：972275