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BMP-2和EGFP重组腺病毒体外转染兔骨髓间充质干细胞的研究

发布时间:2017-10-08 08:41

  本文关键词:BMP-2和EGFP重组腺病毒体外转染兔骨髓间充质干细胞的研究


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【摘要】:目的体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)并观察其生物学特性,通过腺病毒介导人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)和EGFP基因转染兔BMSCs后,观察BMP-2和EGFP的表达情况。方法通过密度梯度离心联合贴壁法,分离、培养兔BMSCs,流式细胞仪检测细胞周期和表面标记,体外诱导兔BMSCs向成骨细胞方向分化。转染后,免疫细胞化学染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测外源基因的表达。结果兔BMSCs周期约有56.84%处于G1期;CD44表达阳性,CD45表达阴性;经成骨细胞诱导后,Ⅰ型胶原免疫组织化学染色阳性,茜素红染色阳性。转染后,Western blot及免疫细胞化学染色显示细胞内BMP-2有较强的表达。结论成功分离、培养兔BMSCs,并鉴定其具有成骨分化能力;构建的Ad-BMP-2/EGFP可高效转染兔BMSCs,并能稳定表达BMP-2目的基因。
【作者单位】: 桂林医学院附属医院四肢创伤手外科;
【关键词】骨形态发生蛋白质类 腺病毒科 骨髓 充质干细胞 基因 转染
【基金】:国家自然科学基金资助项目(31160199)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 骨髓间充质干细胞(BMSCs)属于多能造血干细胞,具有很强的成骨分化能力,已成为组织工程骨研究中最热门、最理想的种子细胞。骨形态发生蛋白(BMPs)是转化生长因子-β(TGF-β)超家族的成员之一,具有很强的诱导间叶细胞向成骨分化的能力,并能够在体内外诱导成骨的形成,促进BMSCs向

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 何春耒;姬广林;刘午阳;吴东宝;何澄;王茂源;叶勇军;莫建文;高辉;;人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒表达载体转染兔骨髓间充质干细胞[J];中国组织工程研究;2012年10期

2 李建军;许晓军;杨军;付勤;;骨形态发生蛋白2基因转染对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响[J];中国医科大学学报;2006年01期

【共引文献】

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1 邹磊;冀红芹;刘禹含;宋阳;韩慧慧;孙会;秦贵信;;日粮不同钙水平对仔猪血液BMP-2和胫骨性能的影响[J];饲料与畜牧;2014年03期

2 井乐刚;乔静;路芳;甄鑫;卢Z,

本文编号:993084


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