Bax-抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用

发布时间：2017-10-21 23:18

  本文关键词：Bax-抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用

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【摘要】：目的通过检测应用Bax抑制肽对新生鼠缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的疗效,探讨Bax-抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用。 方法选取200只7日龄新生Wistor大鼠为研究对象,随机分为以下三组：假手术组；对照组；实验组(bax-抑制肽)。对照组与实验组分别通过结扎左侧颈总动脉以及置于8%的氮氧混合气中2小时建立新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HTBD)模型,假手术组仪游离几侧颈总动脉,不结扎,不低氧处理。实验组于建立模型后0h、6h、12h、24h、48h、3d不同时间点侧脑室注射bax-抑制肽5ug (5ul),其余两组予相同剂量生理盐水于相同时间点侧脑室注射。对照组和假手术组于HIBD模型建立后第12h、24h、2d、3d、7d及实验组HIBD后第7d每组取2只甲醛灌注后断头取脑海马组织病理检测,另取6只新鲜脑组织进行蛋白免疫印迹法(Weston blot)检测活性Caspase-3蛋白、逆转录PCR (RT-PCR)测定Caspase-3mRNA的表达。 结果1、HE染色组织显示：在患侧海马区,实验组及对照组0h、6h、12h、24h、48h各亚组均有病理性损伤,实验组病理损伤程度低于对照组,在72h亚组实验组与对照组病理损伤无明显差异。2、Western blot检测Caspase-3蛋白及RT-PCR检测Caspasc-3mRNA:对照组与假手术组比较,对照组在HIBD后0h、6h、12h、24h海马区Caspasc-3及mRNA依次增多,24h达高峰,48h开始下降,7d时达到基础水平。 3、HIBD后7d Western blot检测Caspase-3:实验组与对照组在0h、6h、12h、24h、48h各业组比较,海马区Caspase-3明显减少,差异有统计学意义；在72h亚组比较差异无统计学意义。实验组各亚组间比较,HIBD后越早注射bax-抑制肽,Caspase-3越少,差异有统计学意义。4、HIBD后7d RT-PCR检测Caspase-3mRNA:实验组和对照组在0h、6h、12h、24h、48h各亚组比较,患侧海马区活性Caspase-3明显减少,差异有统计学意义；在72h亚组比较差异无统计学意义。实验组各亚组间比较,HIBD后越早注射bax-抑制肽,Caspase-3mRNA量越少,差异有统计学意义。 结论：l、新生大鼠缺氧缺血脑组织Caspase-3及mRNA表达增多,神经细胞凋亡增加,24小时达高峰,48小时后逐渐下降。2、HIBD后2天内侧脑室汁射bax-抑制肽可减少Caspase-3及mRNA的表达,减轻神经细胞凋亡。3、在HIBD后越早给予bax-抑制剂治疗,神经保护作用越明显,缺氧缺血后2天内为有效治疗时间窗。
【关键词】：bax-抑制肽 缺氧缺血 脑 新生儿 Caspase-3
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R722.1
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 第1章 材料与方法8-14
• 1.1 材料8-9
• 1.1.1 实验动物8
• 1.1.2 实验药品和试剂8
• 1.1.3 主要实验仪器及设备8-9
• 1.2. 方法9-14
• 1.2.1 实验动物的分组与处理9-10
• 1.2.2 标本采集10
• 1.2.3 制备脑组织切片及HE染色10-11
• 1.2.4 Western blot检测Caspase-3蛋白11
• 1.2.5 Western blot 检测 caspase-3 蛋白的表达量11-12
• 1.2.6 RT-PCR检测Caspase-3mRNA12-14
• 第2章 数据采集及处理14-15
• 2.1 数据采集14
• 2.2 统计学处理14-15
• 第3章 结果15-18
• 3.1 HIBD模型的建立15
• 3.2 新生大鼠脑组织病理15
• 3.3 Western blot检测Caspase-3表达15-16
• 3.4 RT-PCR检测Caspase-3mRNA表达16-18
• 第4章 讨论18-23
• 第5章 结论23-24
• 附图表24-27
• 参考文献27-31
• 综述31-40
• 参考文献37-40
• 攻读学位期间的研究成果40-41
• 致谢41-42

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：1075694