缺氧诱导因子1α及其调控因子在缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺组织的蛋白质表达研究

发布时间：2017-10-27 11:16

  本文关键词：缺氧诱导因子1α及其调控因子在缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺组织的蛋白质表达研究

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【摘要】：目的：通过了解缺氧诱导因子-1α (hypoxia-inducible factor-1alpha, HIF-1α)及其下游调控因子内皮素-1(endothelin-1, ET-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在缺氧性肺动脉高压(hypoxia-induced plmonary hypertension, HPH)新生大鼠肺组织中的蛋白质表达以及与肺动脉压力和肺血管重塑的关系,探讨三因子在该病发病机制中的作用。方法：分别在缺氧3、5、7、10、14、21d建立新生大鼠HPH模型,同时在各个缺氧时间点均建立对照组,每个缺氧时间点HPH组和对照组均为10只大鼠；通过检测平均肺动脉压力(mean pulmonary arterial pressure, mPAP)判断造模是否成功；观察肺小动脉形态学改变并计算肺血管重塑指标：肺小动脉血管壁中层厚度占外径的百分比(the ratio of middle wall thickness to external diameter of small pulmonary arteries, MT%)、肺小动脉中层横截面积占总横截面积的百分比(the ratio of media cross-sectional area to total cross-sectional area of small pulmonary arteries, MA%);利用Western blot方法对肺组织中上述三因子的蛋白质表达量进行分析；分别进行三因子和mPAP、MT%vMA%的相关性分析。结果：1.HPH组新生大鼠在缺氧3～21d mPAP均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。2.缺氧7dHPH新生大鼠出现肺小动脉重塑改变,且缺氧7～21d HPH组MT%和MA%均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。3.肺组织中三种因子蛋白质表达：(1)缺氧5、7d HPH组HIF-1α蛋白质表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)；缺氧3、10、14、21d与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)缺氧3、5、7、10dHPH组ET-1蛋白质表达量显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)；缺氧14、21d与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。(3)缺氧3、5、7d HPH组iNOS蛋白质表达量显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)；缺氧10、14、21d与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。4.相关分析结果：HPH组在缺氧后21d内检测HIF-1α蛋白质表达总体与相应mPAP变化呈正相关(P0.001)；缺氧7d内ET-1、iNOS蛋白质表达总体与相应mPAP变化呈正相关(P0.05)；而HIF-1α、ET-1、iNOS蛋白质表达与MT%、MA%均未发现明显相关性。结论：1.本研究在前期研究基础上从蛋白质水平进一步表明HIF-1α及其下游调控因子ET-1、iNOS在HPH新生大鼠肺组织中表达增加,与肺动脉压力呈正相关,三种因子在该病发病机制中可能具有重要作用。2.HPH新生大鼠肺组织中HIF-1α、ET-1和iNOS蛋白质表达在缺氧早期升高,缺氧后期不再升高,提示存在缺氧耐受。
【关键词】：缺氧诱导因子-1α 内皮素-1 诱导型一氧化氮合酶 缺氧性肺动脉高压 新生大鼠
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R722.1
【目录】：

• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 前言12-15
• 研究内容与方法15-30
• 1. 研究对象15-16
• 1.1 研究对象选择15
• 1.2 动物伦理15
• 1.3 纳入和排除标准15
• 1.4 样本含量15
• 1.5 分组15-16
• 2. 观察指标16
• 3. 主要仪器及试剂16-17
• 3.1 主要仪器16
• 3.2 主要试剂16-17
• 4. 实验方法17-26
• 4.1 建立新生大鼠缺氧性肺动脉高压模型17-18
• 4.2 测定平均肺动脉压力(mPAP)18
• 4.3 肺血管形态学变化分析18-21
• 4.4 肺组织HIF-1α、ET-1和iNOS蛋白质表达检测21-26
• 5. 实验过程中的质量控制26-28
• 5.1 新生大鼠肺动脉高压模型建立过程26-27
• 5.2 测压过程27
• 5.3 标本采集过程27
• 5.4 石蜡切片制作过程27
• 5.5 染色过程27
• 5.6 蛋白质检测过程27-28
• 6. 统计学分析28-29
• 附技术路线图29-30
• 结果30-40
• 讨论40-49
• 小结49-50
• 致谢50-51
• 参考文献51-58
• 综述58-68
• 参考文献64-68
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文68-69
• 导师评阅表69

【参考文献】

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本文编号：1103249