酪酸梭菌和谷氨酰胺对NEC新生鼠肠损伤保护作用的研究

发布时间：2017-11-14 09:14

  本文关键词：酪酸梭菌和谷氨酰胺对NEC新生鼠肠损伤保护作用的研究

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【摘要】：目的：研究酪酸梭菌(C.butyricum)和谷氨酰胺(Glutamine, Gln)对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)血管内皮细胞生长因子(VEGF).血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR-2)、增值细胞核抗原(PCNA)及紧密连接蛋白Claudin-2蛋白表达的影响,从而探讨其对新生大鼠NEC保护作用的机制,并比较两者对NEC的保护效果,为将来酪酸梭菌及谷氨酰胺应用于临床防治NEC提供理论依据。 方法：将不同窝别出生48小时的SD新生大鼠72只,与母鼠分离,雌雄不限,体重5.0—8.0g,随机分为6组,每组12只。对照组：出生48h后予自制鼠乳代乳品喂养,不做任何干预；NEC模型组：出生48h后与母鼠分离,予鼠乳代乳品人工喂养,并定时给予缺氧+冷刺激,连续3天,建立NEC模型。干预1组、干预2组、干预3组、干预4组为在建模的同时给予谷氨酰胺(0.3g/kg/d,1次/天)及不同剂量酪酸梭菌干预,低剂量组(0.2g/kg/d,3次/天)；中剂量组(0.4g/kg/d,3次/天)；高剂量组(0.8g/kg/d,3次/天)。采用免疫组化二步法检测新生大鼠肠道VEGF、PCNA及Claudin-2蛋白的表达情况,用RT-PCR法检测VEGFR-2的表达量,结果用SPSS17.0统计软件进行统计分析,P0.05为差异有统计学意义。 结果： 1、临床表现：对照组新生大鼠每天进食正常,无腹胀及胃潴留,生长发育及活动良好,体重增长可；模型组大鼠造模24小时后相继出现嗜睡、腹胀、腹泻、活动减少、反应迟钝,甚至皮肤苍白、皮温降低、呼吸节律改变等表现,各干预组上述临床症状出现较晚且明显减轻。 2、体重变化及肠道组织病理学评分：对照组体重增长可,肠组织病理评分正常；模型组体重负增长明显,肠组织损伤严重,平均肠组织病理评分值在3分以上；各干预组体重负增长及肠组织评分较模型组明显减轻；模型组体重负增长及肠组织病理评分明显高于各干预组P0.0033)；各干预组体重负增长及肠组织病理评分无明显异常(P0.0033)。 3、肠道VEGF、VEGFR-2、Claudin-2蛋白及PCNA的表达 (1)对照组肠组织有少量、VEGF、VEGFR-2和claudin-2蛋白的表达,模型组的表达量明显增高,各干预组较模型组明显降低；模型组表达量明显高于对照组和各干预组(P0.0033)；对照组表达量明显低于各干预组(P0.0033)；干预1组表达量明显低于干预2、3、4组(P0.0033)；干预2、3、4组间无明显异常(P0.0033)。 (2)对照组PCNA表达量明显增高,各干预组明显减轻,模型组PCNA表达量最低;模型组表达量明显低于对照组和各干预组(P0.0033)；对照组表达量明显高于各干预组(P0.0033)；干预1组表达量明显高于干预2、3、4组(P0.0033)；干预2、3、4组间无明显异常(P0.0033)。 结论： 1.发生NEC时,未成熟的肠黏膜受损,肠黏膜上皮细胞增殖减慢,肠黏膜机械屏障功能受损,通透性增加,病理性新生血管增加,PCNA表达降低,claudin-2蛋白、VEGF及VEGFR-2表达量增加； 2.外源性补充C.butyricum和Gin能够下调NEC新生大鼠肠道VEGF、VEGFR- 2和claudin-2蛋白的表达,上调PCNA的表达,进而对NEC新生大鼠起到保护作用,两者相比较,Gin作用稍优于C.butyricum。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R722.1

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