抗α-1,4-D-聚半乳糖醛酸抗体与非肾炎型儿童过敏性紫癜的关系研究

发布时间：2017-11-26 09:20

  本文关键词：抗α-1,4-D-聚半乳糖醛酸抗体与非肾炎型儿童过敏性紫癜的关系研究

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【摘要】：目的：研究血清抗PGA(果胶的主要成分)抗体,特别是IgA型抗体与儿童非肾炎型HSP的关系,以阐明抗PGA抗体在儿童HSP发生发展中的作用及可能机制。方法：以非肾炎型HSP急性期患儿为研究对象,荨麻疹急性发作、急性呼吸道感染、外科择期手术患儿及新生儿为对照,采用自制的酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗PGA IgA型及IgG型抗体；流式细胞仪检测HSP患儿外周血CD3~+、CD3~+CD4+、CD3~+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+和CD19+CD23+淋巴细胞亚群,以及CD4+CXCR5+和CD4+CXCR5+ICOS+滤泡辅助性T细胞(Tfh),全自动生化分析仪检测C3、C4、IgA、IgG和IgM体液免疫水平,ELISA法测定血清14种食物特异性IgG抗体,并与已知食物不耐阳性消化科腹泻患儿体液免疫功能比较,分析抗PGA抗体与细胞、体液免疫的关系。另外,实时荧光PCR相对定量法检测与Tfh活化相关的Bcl-6基因表达,以及与半乳糖缺陷IgA1(Gd-IgA1)生成相关的糖基转移酶ClGalT1、ST6GalNAc-Ⅱ及维持C1GalT1稳定的伴侣蛋白Cosmc的表达。结果：(1)HSP患儿免疫功能紊乱：与同龄正常人群相比,HSP患儿的CD3~+、CD3~+CD4+T细胞、CD3"CD16+CD 56+NK细胞和CD4/CD8比值显著下降(p0.001),而CD3~+CD8+T细胞、CD3CD19+、CD19+CD23+B细胞显著上升(p0.001)；血清IgA、IgG、IgM及补休C4显著上升(C4p=0.002,余p0.001),而C3差异无显著(p=0.104)。 (2)HSP患儿体内PGA抗体特异性升高：与荨麻疹、急性呼吸道感染、外科对照、新生儿组相比,HSP组抗PGA IgA抗体水平明显升高(p0.001),新生儿组则明显低于其他组(p0.001),而荨麻疹和急性呼吸道感染组高于外科对照组(p0.001)；同样,HSP组抗PGA IgG型抗体水平也明显高于其他组(p0.001),荨麻疹、急性呼吸道感染、外科对照和新生儿组间差异均无统计学意义；(3)抗PGA抗体对HSP具有诊断价值：抗PGA IgA抗体针对HSP的ROC曲线曲线下面积(AUC)为0.91,抗PGA IgG抗体的AUC为0.72,p0.001。(4) HSP患儿IgA相关O-糖基化酶变化：C1GalT1、Cosmc和ST6GalNAc-Ⅱ在HSP组、急性呼吸道感染和外科对照组间不存在差异显著性。(5)HSP患儿PGA抗体与机体免疫指标相关性：抗PGAIgA型抗体除与血清IgA水平相关外(r=0.310,p0.001),仅与C3存在着相关显著性(r=0.125,p=0.049),而抗PGA IgG型抗体与各细胞、体液免疫指标均无相关显著性。 (6)食物不耐阳性不是影响HSP患儿免疫功能的主要因素：94.02% HSP患儿存在着不同程度的食物不耐,食物不耐阴性、不同程度的食物不耐阳性HSP患儿中细胞免疫功能差异无统计学意义,体液免疫功能只有食物不耐阳性HSP患儿的IgG高于阴性患儿(p=0.009),而不同程度的食物不耐阳性HSP患儿间差异均无统计学意义；(7)食物不耐阳性不是引起HSP患儿IgA升高的主要因素：食物不耐阳性HSP患儿的C3、C4、IgA、IgG、IgM均显著高于消化科腹泻患儿(p0.001)；消化科腹泻患儿的IgA、IgG虽高于正常人群,但HSP患儿的IgA平均值比正常人群上升6.34倍,IgG平均值比正常人群上升0.64倍；而腹泻患儿的IgA平均值比正常人群上升0.94倍,IgG平均值比正常人群上升0.10倍。(8)HSP患儿循环Tfh细胞比例明显升高：与急性呼吸道感染和外科对照组相比,HSP组CD4+CXCR5+Tfh细胞和CD4+CXCR5+ICOS+活化的Tfh细胞比例明显升高(p0.001)：HSP组Bcl-6基因表达也高于其他两组,但差异无统计学意义。结论：抗PGA抗体在儿童HSP中明显升高,且抗PGA IgA型抗体的特异性要优于抗IgG型抗体,说明抗PGA抗体,尤其是IgA型抗体与HSP发生密切相关；食物不耐不是导致HSP患儿IgA和IgG型抗体升高的主要因素,细胞免疫功能紊乱,尤其是与粘膜免疫密切相关的Tfh细胞活性的增强可能是抗PGA IgA型抗体升高的主要因素；目前的实验证据不支持Gd-IgAl在非肾炎型HSP发病中的作用,PGA和抗PGA特异性抗体,尤其是IgA型抗体等可能在HSP发病中扮演更重要的角色,因此检测血清中抗PGA IgA抗体水平对诊断HSP、明确病因以及预防治疗疾病有一定指导意义,而研究其在HSP发生发展中的作用对揭示HSP病因和发病机制有着重大的意义。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.5

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本文编号：1229328