轮状病毒致乳鼠感染后肝脏损害及细胞因子表达水平的实验研究

发布时间：2018-01-22 07:30

  本文关键词： 轮状病毒 乳鼠 肠道外损害 肝脏 细胞因子　出处：《蚌埠医学院》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：1.建立轮状病毒(Rotavirus，RV)肠道内、肠道外感染的BALB/C乳鼠模型。2.检测乳鼠外周血IL-12(Th1类细胞因子）和IL-10（Th2类细胞因子）的表达水平，比较IL-10，IL-12两种细胞因子在不同时间点，以及在RV肠道内、肠道外感染中表达的差异，从而进一步了解Th1/Th2失衡与RV肠道外脏器损害的相关性，为临床上防治重症RV感染提供新的思路和方法。3.观察RV感染后，乳鼠的临床表现和不同时间点肝脏组织的形态学改变，了解其病理损害的特点。 方法：将恒河猴RVSA11株分装，置-80℃冰箱冷藏备用。选用3～4日龄清洁级BALB/C乳鼠90只，随机分成3组，每组30只，即正常对照组：不做任何特殊处理；肠道内组：经口腔滴注100μlSA11株病毒培养液（病毒滴度TCID50为1×10-4）；肠道外组：经腹腔注射100μlSA11株病毒培养液。病毒接种后，各组乳鼠隔离饲养。以接种当天为第0天计，每日观察乳鼠的精神状态、活动情况、体型、毛色光泽度、大便变化情况以及有无皮肤脱水及肛门红肿等，收集乳鼠大便检测其中轮状病毒抗原。分别于RV感染后的第3天和第8天，收集乳鼠外周血，离心后留取血清，经酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测细胞因子IL-10和IL-12的表达水平。同时处死乳鼠，留取肝脏组织，苏木精－伊红（HE）染色，光镜下观察肝脏组织的病理改变。 结果：1.RV感染后乳鼠食欲不佳，精神萎靡，反应差，皮肤皱褶，腹部肿胀，肛门红肿，生长发育缓慢，并出现腹泻，表现为大便次数和大便量增多。在RV感染后第3天，腹泻达最高峰，以后逐渐减轻，至第8天基本恢复正常。感染组乳鼠大便RV抗原检测均为阳性。2.RV感染后第3天，肠道内组和肠道外组乳鼠血清中IL-12表达水平较正常对照组显著升高（P0.01、P0.01），但肠道内、外组间IL-12的表达水平无差异性（P＞0.05）；至RV感染后第8天，肠道内、外组IL-12水平均有所下降，但仍高于正常对照组（P0.05、P0.01）。肠道外组IL-10水平在RV感染后第3天高于肠道内组和正常对照组（P0.05、P0.01），至第8天降至正常范围，三组间无显著性差异（P＞0.05）。在整个实验过程中，肠道内组IL-10表达水平无显著性改变（P＞0.05）。3.光镜下肝细胞体积增大，胞质疏松透明，细胞核分裂甚至消失，肝细胞坏死，空泡样变性明显，可见大量淋巴细胞浸润。并且，肠道外组乳鼠肝脏病理损伤程度较肠道内组重。 结论：1.RV肠道内、肠道外感染BALB/C乳鼠模型建立成功。RV肠道内感染乳鼠后以IL-12表达为主，Th1应答占优势；肠道外感染乳鼠早期呈现Th1/Th2混合反应，而后期以Th1应答占优势。推测Th1/Th2类细胞因子失衡，可能是导致轮状病毒肠道外肝脏损害的重要机制。2.RV感染后，可引起乳鼠肝脏组织发生病理改变，但随病情的恢复，，肝脏损害也逐渐愈合，呈现一定的自限性。
[Abstract]:Objective 1. To establish rotavirus rotavirus (RV) in the intestine. The expression levels of IL-12(Th1 cytokines and IL-10(Th2 cytokines in peripheral blood of neonatal rats were detected. To compare the expression of IL-10 IL-12 and IL-12 in different time points and in RV intestinal tract. So as to further understand the relationship between Th1/Th2 imbalance and external organ damage of RV, and provide a new way of thinking and method for clinical prevention and treatment of severe RV infection. 3. Observe the infection of RV after RV infection. The clinical manifestations and morphologic changes of liver tissues at different time points in neonatal rats were studied to understand the characteristics of pathological damage. Methods: the RVSA11 strain of rhesus monkey was divided into three groups, which were refrigerated at -80 鈩

本文编号：1454087